[發明專利]一種γ-聚谷氨酸-氧釩復合物及其制備和應用無效
| 申請號: | 200810039325.5 | 申請日: | 2008-06-20 |
| 公開(公告)號: | CN101293101A | 公開(公告)日: | 2008-10-29 |
| 發明(設計)人: | 胡榮章;黃靜;吳自榮;吳葉林;劉堅;孫昭;劉雯;李文娟 | 申請(專利權)人: | 華東師范大學 |
| 主分類號: | A61K47/48 | 分類號: | A61K47/48;A61K47/34;A61K33/24;A61P3/10;C12P3/00;C12N1/20;C12R1/125 |
| 代理公司: | 上海德昭知識產權代理有限公司 | 代理人: | 程宗德;石昭 |
| 地址: | 200062*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 谷氨酸 復合物 及其 制備 應用 | ||
1、一種VO-γ-PGA復合物,其特征在于,該復合物由γ-PGA與VOSO4通過前者上的羧基與后者上的VO2+形成的配位鍵連接而成,其分子結構通式和結構式分別為:
(VO2+)m-(γ-PGA),其中,m是介于2500~6000的正整數,和其分子量介于1000kD~2000kD。
2、權利要求1所述的VO-γ-PGA復合物的制備方法,其特征在于,具體操作步驟:
第一步γ-PGA-Na的制備
將購于中國微生物菌種保藏中心的B.Subtils.sp活化后按3%~7%的接種量接入LB液體培養基,每升LB液體培養基中加入麥芽糖30g~70g,酵母膏5g~15g,谷氨酸鈉10g~50g,NaCl?5g~15g,KH2PO41g~9g,MgSO4·7H2O?0.1g~0.9g,培養基的pH值為5.0~7.0,20℃~50℃下搖瓶發酵24h~72h,得發酵液,發酵液加蒸餾水稀釋1~7倍,8000r/min~15000r/min離心10~20min去菌體,將無水乙醇加入上清液中,上清液與無水乙醇的體積比為1∶1~5,攪拌得沉淀,真空干燥,得γ-PGA-Na粗品,該粗品溶于蒸餾水,濃度為0.5%~1.5%,以蒸餾水為透析液透析,過濾,得濾液,濾液冷凍干燥,得γ-PGA-Na,其分子量介于1000kD~2000kD,每升培養基制得γ-PGA-Na20.0g~30.26g;
第二步VO-γ-PGA復合物的制備
將1.5g~15g第一步制備的γ-PGA-Na溶于450ml蒸餾水,攪拌至完全溶解,得γ-PGA-Na溶液,2.62gVOSO4溶于200ml蒸餾水,攪拌至完全溶解,得VOSO4溶液,攪拌下將VOSO4溶液加入γ-PGA-Na溶液,γ-PGA-Na溶液的-COOH與VOSO4溶液的VO2+的摩爾比為1~10∶1,30℃~70℃下,攪拌反應0.5h~5h,20℃~30℃下,10000r/min~15000r/min離心20min~40min,棄上清液,沉淀溶于5~20倍體積的蒸餾水,20℃~30℃下,10000r/min~15000r/min離心20min~40min,棄上清液,得到VO-γ-PGA復合物粗品,蒸餾水洗沉淀1次~5次,過濾,棄濾液,真空干燥,得1.42g~14.2g的VO-γ-PGA復合物。
3、用權利要求1所述的VO-γ-PGA復合物降低I型糖尿病小鼠的血糖的方法,其特征在于,將濃度為20mmol/mL的VO-γ-PGA復合物溶于0.1%的瓊脂糖溶液以灌胃方式給I型糖尿病小鼠口服,劑量介于0.1mmol?V/kg/day~0.4mmol?V/kg/day。
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