[發明專利]自體血纖維蛋白溶解酶原的提取方法及裝置

有效

• 申請號: 200810037651.2
• 申請日: 2008-05-20
• 公開（公告）號: CN101586098A
• 公開（公告）日: 2009-11-25
• 發明（設計）人: 長谷川冰
• 申請（專利權）人: 博傲西騰醫療科技(上海)有限公司;長谷川冰
• 主分類號: C12N9/68
• 分類號: C12N9/68;C12M1/00;C12M1/36
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 徐 迅

技術領域

本發明涉及血纖維蛋白溶解酶原的提取方法。更具體地說，涉及自體血纖維 蛋白溶解酶原的提取方法，該方法不包括常規的對洗脫液進行脫鹽和對洗脫的自 體血纖維蛋白溶解酶原進行濃縮的步驟。本發明還涉及血纖維蛋白溶解酶原的 自動提取裝置。

背景技術

纖維蛋白溶解酶原存在于血液中，在激活物作用下轉變為纖維蛋白溶解 酶，后者具有酶的作用，可使纖維蛋白凝塊溶解，故能溶解血栓。纖維蛋白溶 解酶作為酶療法也被用于誘導眼科玻璃體后脫離(PVD)的產生，其對于許多 玻璃體視網膜疾病，例如孔源性視網膜脫離、糖尿病視網膜病變、黃斑裂孔、 黃斑前膜、視網膜分枝靜脈阻塞等的發展及預后有良好的作用。

通常，現有技術中使用的自體血纖維蛋白溶解酶原的提取方法包括以下步驟：

(1)吸附步驟：從患者處抽血后，通過連結部分的切換將血液或分離后的血 漿灌流到吸附器內；流過吸附器后的廢液流入廢液回收部；

(2)清洗步驟：通過連結部分的切換將清洗液(含有0.5M氯化鈉的50mM 磷酸緩沖液，pH值為7.2)灌流到吸附器內；流過吸附器后的廢液流入廢液回收部；

(3)洗脫步驟：通過連結部分的切換將洗脫液(含有0.1M氯化鈉和0.2Mε- 氨基己酸的50mM磷酸緩沖液，pH值為7.2)灌流到吸附器內；流過吸附器后的 洗脫液回收到血液成分回收器；

(4)濃縮步驟：通過血液成分回收器(溶媒吸收型濃縮器)靜置30分鐘進 行濃縮；

(5)脫鹽利濃縮：通過連結部分的切換將脫鹽液(生理鹽水)灌流到血液成 分回收器內進行脫鹽和濃縮；

(6)提取步驟：提取血液成分回收器中的所有溶液。

在實現上述提取順序時，整個系統由血液射出部、清洗液射出部、洗脫液射 出部、吸附器、廢液回收部、血液成分回收器(溶媒吸收型濃縮器)、脫鹽液射 出部、以及將上述部分進行切換連通的4個連通部分和連結各部間的管路構成。 參看JP?2006-160731和JP?2006-136802，上述專利申請在本文中全文引用作為 參考。

但是，上述現有技術的方法由于需要在濃縮器中進行濃縮，對于操作工藝和 操作系統的要求很高，同時多個轉換部件的連結，對于整體系統的氣密性要求增高， 從而導致工藝的復雜性增加，操作時間增加、生產成本增加。因此，要求操作更為 簡便的、提取時間更短、成本更低的自體血纖維蛋白溶解酶原的提取方法。

因此，本領域迫切需要開發出操作簡便、省時、高效、低成本的自體血纖維 蛋白溶解酶原的提取方法。

發明內容

本發明的目的就是提供一種操作簡便、省時、高效、低成本的自體血纖維蛋 白溶解酶原的提取方法。

一方面，本發明提供了一種自體血纖維蛋白溶解酶原的提取方法，它包括：

(a)吸附步驟，用于吸附從患者自體抽出的血液中的纖維蛋白溶解酶原；

(b)清除步驟，用于清除上述步驟(a)中吸附的自體血纖維蛋白溶解酶 原以外的其他血液成分；

(c)洗脫步驟，用于洗脫經上述步驟(b)中已清除了不純部分后且吸附 在吸附材料上的自體血纖維蛋白溶解酶原；其中，用于洗脫的洗脫液根據所采 用的吸附材料進行選擇，例如使用氨甲環酸時，其濃度為0.004-0.04M，洗脫 時間(即，洗脫液流過吸附器的時間)通常≤3-7分鐘；以及

(d)提取步驟，用于收集上述步驟(c)中洗脫的自體血纖維蛋白溶解酶 原；

其中，該方法不包括對洗脫液進行脫鹽和對洗脫的自體血纖維蛋白溶解酶 原進行濃縮的步驟。

在一個優選的實施方式中，所述洗脫液是含有氨甲環酸的生理鹽水。

在另一個優選的實施方式中，所述用于清除步驟(b)中吸附的自體血纖維 蛋白溶解酶以外的其他血液成分的清洗液為生理鹽水。

另一方面，本發明提供了一種自體血纖維蛋白溶解酶原的提取裝置，它包 括：