[發明專利]一種毒隱翅蟲素的鑒別方法

有效

• 申請號: 200810036245.4
• 申請日: 2008-04-18
• 公開（公告）號: CN101266231A
• 公開（公告）日: 2008-09-17
• 發明（設計）人: 萬平;李利珍;趙梅君;胡佳耀
• 申請（專利權）人: 上海師范大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司
• 代理人: 何葆芳

技術領域

本發明涉及一種毒隱翅蟲素的鑒別方法，具體說，是涉及一種利用液相色譜-質譜聯用法鑒別毒隱翅蟲素的方法。?

背景技術

毒隱翅蟲是隱翅蟲科中的一個屬，已知種類超過250種，產自除南極洲以外的世界各地，中國已報道的毒隱翅蟲有21種。毒隱翅蟲主要生活在潮濕的農田、菜地、雜草叢中，是山溝、農田常見的小型昆蟲。我國常見的毒隱翅蟲有青翅蟻形隱翅蟲(又稱梭形毒隱翅蟲、黃足蟻形隱翅蟲)，黑足蟻形隱翅蟲，多毛隱翅蟲，巾形毒隱翅蟲，小紅毒隱翅蟲，蟻態毒隱翅蟲，西藏毒隱翅蟲等7種，其中以青翅蟻形隱翅蟲分布最廣，遍及各省及臺灣等地區。?

毒隱翅蟲的卵、幼蟲、蛹和成蟲(除翅以外的各部分)都有毒素存在，成蟲的毒素主要來源于血淋巴，雌、雄蟲體內都含有毒素。毒隱翅蟲的毒素是蟲體用來抵御外來侵襲的化學物質。毒隱翅蟲的毒液化學成分復雜，含有醛類、醌類、萜類等，有報道其毒素主要為3種，分別是毒隱翅蟲素、擬毒隱翅蟲素和毒隱翅蟲酮。其中，毒隱翅蟲素的含量最高，分子量為503.65，溶于有機溶劑乙醇、乙醚、氯仿及苯，不溶于水，結晶的毒隱翅蟲素在112℃熔化，弱酸性，水中煮沸1h不被破壞。?

本發明人研究發現毒隱翅蟲提取物具有促進糖尿病皮膚潰瘍愈合、抑制HL-60人白血病細胞株生長、抑制BEL-7402人肝癌細胞株生長及促進毛發生長的藥用功效，在醫學上具有廣泛的應用前景，可望用于制備治療糖尿病皮膚頑固性潰瘍、治療某些類型的人白血病和人肝癌及促進毛發生長的藥物制劑。但目前尚未有毒隱翅蟲素的鑒別方法，使毒隱翅蟲提取物在臨床上的研究存在很大困難。?

發明內容

本發明的目的是提供一種毒隱翅蟲素的鑒別方法，為毒隱翅蟲提取物在臨床上的研究提供便捷。?

為解決上述技術問題，本發明的技術方案如下：?

本發明的毒隱翅蟲素的鑒別方法，包括樣品處理及數據獲取過程，其特征在于，具體過程如下：?

1)樣品處理?

將毒隱翅蟲提取物以50％HPLC級甲醇稀釋100倍；?

2)數據獲取?

首先利用液相色譜-質譜聯用儀在負離子模式和正離子模式下分別掃描毒隱翅蟲提取物稀釋液，所述液相色譜條件為：色譜柱是Shiseido?C18/100×2.1mm/5u、流動相是體積比為70∶30的甲醇一水及含1mM甲酸銨的溶液體系、流速是0.2ml·min^-1、柱溫是30℃、進樣量為10μl；所述質譜條件為：Turbo?Ionspray離子源、三重四極桿質量檢測器、噴霧氣13L/min、氣簾氣12L/min、噴霧電壓5KV、聚焦電壓400V、入口電壓10V、出口電壓10V、輔助加熱器溫度450℃及掃描質量范圍為400～800amu；獲取母離子峰數據：色譜峰保留時間t_R＝4.0min，準分子離子峰[M-H]^-為m/z＝502.4，與甲酸根的加合離子峰[M+HCOO]^-為m/z＝548.4，與鈉離子的加合離子峰[M+Na]⁺為m/z＝526.4；?

然后采用微量進樣泵柱后注射方式進行碰撞誘導解離和掃描，獲取子離子峰數據：m/z?470、m/z?438，m/z?502.2、m/z?470、m/z?438，m/z?494.2、m/z462.2、m/z?340。?

本發明提供的毒隱翅蟲素的鑒別方法，由于采用了液相色譜-質譜聯用系統，使得該鑒別方法具有優良的靈敏度，鑒別結果準確、有效及可靠，且操作方便，為毒隱翅蟲提取物在臨床上的研究提供了方便。?

附圖說明

圖1為毒隱翅蟲提取物稀釋液在負離子模式下掃描的0～8min色譜圖；?

圖2為毒隱翅蟲提取物稀釋液在正離子模式下掃描的0～8min色譜圖；?

圖3為母離子峰(t_R＝4.0min)在負離子模式下的質譜圖；?

圖4為母離子峰(t_R＝4.0min)在正離子模式下的質譜圖；?

圖5為m/z＝526.4離子的子離子質譜圖；?

圖6為m/z＝548.4離子的子離子質譜圖；?

圖7為m/z＝502.2離子的子離子質譜圖；?

圖8為毒隱翅蟲素化合物的化學分子結構式。?

具體實施方式

下面通過實施例對本發明作進一步說明，其目的僅在于更好理解本發明的內容而非限制本發明的保護范圍。?

實施例?

1、樣品處理?