[發明專利]一種在同一只犬體內建立多種疾病動物模型的方法及其應用

無效

• 申請號: 200810033613.X
• 申請日: 2008-02-15
• 公開（公告）號: CN101507655A
• 公開（公告）日: 2009-08-19
• 發明（設計）人: 宋浩亮;陳春麟;毛晨
• 申請（專利權）人: 上海美迪西生物醫藥有限公司;美迪西普亞醫藥技術(上海)有限公司
• 主分類號: A61B19/00
• 分類號: A61B19/00;G01N33/15
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及屬生物技術，具體涉及一種在同一只犬體內建立多種疾病動物模型的方法。

背景技術

冠心病、高血壓、膽石癥等疾病嚴重危害著人類健康，患病人群呈現逐步增多的趨勢。采用動物模型進行新化合物的活性篩選是新藥開發中常用的方法，系統全面的評價藥物在一種或者多種適應癥的生理活性是藥物臨床應用的基礎。由于新藥開發的成本不斷增加、時間逐步增長，在一定程度上制約了新藥開發的進程。目前，在新藥開發的前期過程中，采用細胞水平的大規模篩選已應用廣泛，但因體內、體外生理環境的差異，使細胞水平的實驗結果并不能有效、準確地說明化合物的適應癥。目前文獻報道單一的動物模型很多，例如膽石癥動物模型、心肌缺血動物模型、高血壓動物模型等，但在研究中，由于往往只能采用單一模型進行藥物在體研究，因而，耗時長，動物使用數量多，成本高。另外，一次實驗只能判斷化合物的一種適應癥，并且與一般臨床疾病患者病癥和并發癥并存的情況不符。因此，單一的動物模型不能滿足新藥開發的需要，因此，建立在一只動物體內多種疾病的實驗動物模型，成為研究的新目標，這樣，不但可以有效快捷的篩選化合物的藥效及其機理，發現目標化合物潛在的新的臨床適應癥，而且能降低成本，減少動物使用的數量。

本發明要解決的技術問題是在一只動物體內建立多個疾病的動物模型，它和人類疾病及其并發癥狀況相似，能夠有效篩選化合物的藥效和作用靶點，耗時短，動物使用量少，成本低。

發明內容

本發明要解決的技術問題是在同一只犬體內建立多個疾病的動物模型，它和人類疾病及其并發癥狀況相似，能夠有效篩選化合物的藥效和作用靶點，耗時短，動物使用量少，成本低。

本發明提供了一種在同一只犬體內建立多種疾病動物模型的方法。

本發明提出的在同一只犬體內建立多種疾病動物模型的方法通過以下方案實現：

(1)建立犬膽石癥模型；

(2)在(1)中的犬上建立膽石癥和心肌缺血模型；

(3)在(2)中的犬上建立膽石癥和心肌缺血并高血壓模型。

本發明在同一只犬體內建立多種疾病動物模型的方法的具體步驟如下：

(1)建立犬膽石癥模型

選擇Beagle犬，雌雄不限，10-12公斤，分為正常組和模型組，普通級動物房觀察室(溫度18-28℃、日溫差≤5℃、相對濕度40-70％、氣流速度0.1-0.2m/s、落下菌數個≤30/皿、氨濃度≤14mg/m³、噪聲≤60dB、照度150～3001x、晝夜明暗交替時間12/12h)飼養6天。模型組犬于膽囊體部做一荷包縫合，從荷包中央切一小口，納入直徑大于3.5毫米的人膽囊結石1枚，結扎荷包線，關閉腹腔，連續觀察60天。以模型組造模前后結石重量比較有統計學上的顯著差異P<0.05為造模成功的標準。

(2)在完成(1)步驟后的犬上建立膽石癥和心肌缺血模型

在完成(1)步驟后的犬的實驗過程中，用10％的烏拉坦將犬靜脈麻醉，背位固定，剪頸部毛后氣管插管，左側第4肋間開胸術，開胸后連人工呼吸機維持正常呼吸，暴露心臟，剪開心包做心包床，分離冠狀動脈左前降支中段穿線以備結扎，制備心肌缺血模型，測定犬心肌酶和心外膜心電圖。以模型組和正常組比較，導聯數(N-ST)和ST段升高值的總和(∑ST)有統計學上的顯著性差異P<0.05為造模成功的標準。

(3)在完成(2)步驟后的犬上建立膽石癥和心肌缺血并高血壓模型

在完成(2)步驟后的犬的實驗過程中，將腹部下腎區托起，手術區備皮，乙醇碘酒消毒，從脊柱旁2厘米出沿肋骨下緣切一5厘米切口，剝離組織找到犬腎臟，分離腎總動脈，以手術線結扎，結扎線和腎動脈之間夾以直徑為腎動脈1/2-1/3的尼龍線，結扎后取出尼龍線，依次縫合肌肉，皮下組織和皮膚，以碘酒和乙醇消毒手術傷口。術后測定犬平均動脈壓和左心室內壓。以模型組和正常組比較，平均動脈壓和左心室內壓有統計學的顯著性差異P<0.05為造模成功的標準。

本發明的有意效果是：

本發明提供的方法與現有的各種犬的疾病模型相比，更真實的模擬了臨床疾病的發生及其存在的并發癥的實際情況，可針對性的用于篩選治療膽石癥、冠心病、高血壓的藥物。即通過少量的多疾病模型動物，篩選出化合物的藥效以及其作用靶點，同時還可以通過本發明建立的動物模型發現化合物新的未知的適應癥，比單一的動物模型在研究周期、使用動物數量、成本、發現化合物潛在適應癥等方面有明顯優勢。

具體實施方式

本發明結合具體實例作進一步說明。應理解，這些實例僅用于說明之目的，而不限于本發明范圍。