[發明專利]一種豬免疫性狀相關基因TAP1及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200810028459.7
• 申請日: 2008-06-02
• 公開（公告）號: CN101285065A
• 公開（公告）日: 2008-10-15
• 發明（設計）人: 吳珍芳;孫奴奴;陳慧勇
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 林麗明;任重

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，具體涉及一種豬免疫性狀相關基因TAP1及其制備方法，以及其突變位點檢測方法和在建立適用于豬免疫性狀的分子標記方面的應用。

背景技術

近10年以來，現代育種技術使豬的生產性能(生長，胴體與肉質性狀)得到了顯著的改良，而對豬健康及抵抗疾病能力的遺傳改良卻重視不夠。

隨著分子遺傳學的飛速發展，畜禽遺傳圖譜的不斷完善，遺傳標記的不斷補充，使一些與疾病抗性有關的基因或遺傳標記相繼被發現。采用遺傳學方法從遺傳本質上提高畜禽的抗性，減少疾病的發生，對于控制疾病，提高養豬效益和安全養殖具有標本兼治的重要意義。

個體免疫力是衡量動物健康的重要指標(Knapp等，2000)，它屬于數量性狀，其中涉及相關基因較多，分子機制很復雜。免疫力與生產性能通常表現為表型負相關關系，這為育種工作者提出了一個大的難題，即如何在保持和提高生產性能的基礎上同時提高個體免疫能力是育種工作者研究的新課題。最近國外少量研究表明豬免疫能力與生產性能的關系是雙向的，某種情況下即正常狀態免疫能力的增強能提高豬的生長速度，飼料效率等主要生產性能，而單純針對生產性能的選擇卻導致豬免疫能力下降即相關等位基因的丟失或頻率的降低。但是，目前二者的相互關系仍然不是很明了，從基因組水平揭示出生產性能和免疫力的控制基因體系間的具體關系，是解決上述難題的有效途徑。

在抗病育種中，抗病基因的尋找是關鍵。腸毒素型大腸桿菌(Enterotoxigenic?Escherichia?coli，ETEC)是引起仔豬瀉痢的主要病原體之一(施啟順，2001)，研究表明動物體內如果缺乏大腸桿菌K88受體或F18受體，就會對相應的血清型大腸桿菌引起的腹瀉產生抗性，目前編碼大腸桿菌K88受體(K88abR和K88acR)的基因已經定位在豬13號染色體上靠近轉鐵蛋白基因的位置(Edfors-Lilja等，1997)，α-(1，2)-海藻糖轉移酶1(α(1，2)fucosyltransferase，FUT1)基因是F18受體(ECF18R)的候選基因，位于豬6號染色體上(Meijerink等，1997)。

此外，豬第7號染色體著絲粒附近的主要組織相容性復合體(Major?histocompatibility?complex，MHC)基因已經被證明與抗體對多種抗原的應答、細菌的噬菌作用、對螺旋旋毛蟲和惡性黑素瘤的易感性等性狀有相關(Peelman等，1996)，其它與抗病力有關的基因還有MX1(Myxovirus(influenza)resistance?1，粘液病毒(流感)抗性因子1)、NRAMP1(Natural?resistance-associated?macrophageprotein?1，與巨噬細胞有關的天然抗性蛋白1)，IL1(Interleukins?1，白細胞介素1)、PPARG(Peroxisome?proliferator?activated?receptor?gamma，過氧化物酶體增殖激活受體γ)等基因。

Rothschild實驗室長期從事MHC基因單倍型與豬初生重、斷奶重、生長速度、背膘厚等性狀有關等性狀的研究，他們認為MHC基因單倍型與上述生產性能存在相關關系(Rothschild?MF，1998)。

內源性抗原通過MHC類分子提呈給細胞毒性T細胞(CTL)是機體細胞免疫識別的重要階段。抗原處理相關轉運體(transporterassociated?with?antigen?processing，TAP)負責抗原肽從胞漿到內質網的轉運，在MHC類分子的抗原處理及提呈過程中發揮重要作用，TAP結構和功能障礙將導致細胞表面MHC類分子表達缺陷，這成為腫瘤細胞、病毒感染細胞逃逸免疫監視的重要機制。

人的TAP基因是于1985年首次發現的，TAP是由TAP1與TAP2亞單位以異二聚體的形式發揮生物學效應，在MHC-I類分子介導的抗原遞呈途徑中起著重要作用(Colonna?et?al.，1992)。因此，TAP的異常將嚴重影響抗原遞呈，成為病毒感染及腫瘤細胞逃避免疫監視的重要機制，如卵巢癌、肝癌及宮頸癌(Vermeulen?et?al.，2007)。