[發明專利]一種新的西曲依醇(紅杉醇)含量測定方法

無效

• 申請號: 200810028344.8
• 申請日: 2008-05-28
• 公開（公告）號: CN101592633A
• 公開（公告）日: 2009-12-02
• 發明（設計）人: 王霆;王艷麗;鄧桂興;孫明杰
• 申請（專利權）人: 廣州威爾曼新藥開發中心有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/50;G01N30/26;G01N30/74
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技術領域

本發明涉及一種儀器分析方法，其具體涉及一種用高效液相色譜蒸發光散射 法測定西曲依醇的含量。

發明背景

西曲依醇(又名紅杉醇，sequoyitol)(如圖1)最初由紅豆杉中提取而得， 具有降糖效果。但其沒有紫外吸收，因此增加了檢測難度。曾有報道[梁敬鈺， CN1488344A]用柱前衍生化法測定其含量，該方法比較復雜，操作步驟比較繁瑣， 并且無法判斷衍生化是否完全和是否得到均一物質，因此，檢測的準確度難以得 到保證。

發明內容

本發明的目的是克服現有的檢測方法繁雜的缺點，提供一種靈敏度適宜，方 便檢測西曲依醇含量的高效液相色譜蒸發光散射測定法。

本發明的目的可以通過以下措施達到：色譜條件中固定相用硅膠基質的氨丙 基為填充劑；流動相采用甲醇-水或乙腈-水；檢測器采用蒸發光散射檢測器。其 中流動相體系采用甲醇或乙腈與水體積比為95∶5～65∶35，流速為0.5～2mL/min， 柱溫為15～55℃；其中高效液相色譜蒸發光散射測定時，蒸發光散射中漂移管溫 度為25～70℃，霧化氣體流速為0.5～3L/min。

通過研究建立了優化的檢測方法，優選的指標包括：

1、其色譜條件中固定相用硅膠基質的氨丙基為填充劑；流動相采用甲醇-水或乙 腈-水；檢測器采用蒸發光散射檢測器。

2、流動相體系采用甲醇-水或乙腈-水，體積比為95∶5～65∶35；其中甲醇與水體積 比最優比例為75∶25，乙腈與水體積比最優比例為80∶20。

3、流動相的流速為0.5～2mL/min，柱溫為15～55℃；其中最佳流速為1mL/min， 柱溫為30℃。

4、蒸發光散射檢測器中，漂移管溫度為25～70℃，霧化氣體流速為0.5～3L/min； 其中最優溫度為40℃，霧化氣體最佳流速為1L/min。

有關本檢測方法的詳細描述，請見以下實驗實例：

實例一檢測方法的優化

1.流動相的選擇與優化

西曲依醇為多羥基環醇類化合物，有較好的水溶性，因此考察了甲醇或乙腈 與水為流動相。結果見表1：

表1流動相的選擇

結果表明：當條件1、2、3時主峰都能得到較好的分離，但條件3所用時間 相對較少，1的時間最少，但是噪音有點大，主峰有點平頭，故選擇條件3作為 分析條件。

2.柱溫的選擇

將柱溫箱溫度分別設定為30℃、35℃、40℃，結果表明溫度對主峰的出峰 時間、峰面積影響很小，由于溫度越高，對色譜柱損害越大，故測定時選擇30 ℃。

實例二新的檢測方法的確認

1.標準曲線的制備：精密稱取西曲依醇對照品適量于25ml量瓶中，加水 7.5ml，搖勻；再加乙腈至刻度，搖勻，得供試品溶液。另取對照品25mg，同法 配制對照品溶液。分別量取2μl、5μl、10μl、15μl、20μl、40μl注入液相色譜儀， 記錄蒸發光散射儀檢測的譜圖，以進樣量的對數值(x)為橫坐標，以峰面積的 對數值(y)為縱坐標，繪制標準曲線，得到線性方程為y＝1.2119x+20.594(γ ＝0.9996)。圖譜見附圖2～7，數據見表2：

表2標準曲線試驗數據

由以上結果可以看出：當進樣量在2.0μg～40μg之間時，進樣量對數值與峰 面積對數值有良好的線性關系，表明新方法可靠。

2.精密度試驗：取上述對照品溶液，連續進樣6次，以峰面積計算RSD，試驗 結果如表3：

表3精密度試驗結果

連續進樣6次的RSD為2.83％，表明儀器的精密度良好，方法可靠。

3.穩定性：稱取西曲依醇樣品適量，按上述方法配制成樣品溶液，每隔一定時 間進樣，記錄其峰面積，測試結果見表4：

表4穩定性試驗數據

從以上結果可以看出：24h內樣品峰面積的RSD為2.19％，表明樣品溶液 放置24h后仍然穩定，因此新方法可以有效進行檢測。

4.重復性：稱取西曲依醇樣品6份，按前文所述液相色譜蒸發光散射方法 以標準曲線計算含量，圖譜見附圖8～13，結果如表5：

表5重復性試驗數據

結果顯示：6次測定的RSD為2.88，表明本方法重復性良好。