[發明專利]南海真菌中新鹿角縮酮類化合物在制備胞內抗氧化應激藥物中的應用

無效

• 申請號: 200810028125.X
• 申請日: 2008-05-15
• 公開（公告）號: CN101580511A
• 公開（公告）日: 2009-11-18
• 發明（設計）人: 王冠蕾;龐冀燕;林永成;錢艷;劉捷;陳文亮;解煜
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C07D493/22
• 分類號: C07D493/22;C07D493/04;C12P17/18;A61K31/35;A61P9/12;A61P43/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司
• 代理人: 劉孟斌

技術領域

本發明涉及的南海內生真菌鹿角菌Xyloraria?sp.2508中已分離鑒定并篩選到一系列鹿角縮酮(xyloketals)類化合物在高血壓預防治療中的應用。

背景技術

自從1929年從真菌中發現青霉素以來，真菌的代謝產物成為了藥物的豐富來源，絕大多數臨床應用的抗生素都來源于真菌和細菌，真菌的代謝產物還有其他的藥用價值，如抗腫瘤，治療心血管疾病，免疫調節劑等。由于海洋環境的特殊性，海洋微生物種類繁多，來源廣泛，篩選獲得率高，根據John教授在2005年《Natural?Product?Reports》的報道，2003年發現海洋天然產物新化合物中，海洋微生物是主要來源之一(另外包括海綿和腔腸動物)。海洋真菌能提供陸生真菌無法提供的代謝產物。

植物內生真菌(Endophytic?fungi)生活在高等植物的組織中，是植物微生態系統中的天然組成成分，在進化過程中與宿主建立了和諧的共生關系，據保守的估計內生真菌的種類繁多，大約有1.5×10⁶種，由于數量龐大，而且與其他生物之間緊密的生態關系，使這類真菌成為潛在的具有產生豐富的次級代謝產物的來源。國際上這方面的研究從八十年代以來呈加速發展的趨勢，國內從海洋微生物也發現一批新的活性物質(Lin?YC?et?al，J.Org.Chem.；Lin?YC?etal.Tetrahedron?2000)。

發明內容

本發明的目的在于提供一類新的來源于海洋真菌的具有潛在藥用價值的化合物在抗氧化應激及影響血管重構方面的應用價值。

本發明的技術方案如下：

從南海內生真菌鹿角菌Xyloraria?sp.2508中已分離鑒定并篩選到一系列鹿角縮酮(xyloketal?A-F)類化合物中，結構分別如下：

本發明的化合物可以從真菌2508的發酵液中提取分離得到，所用的真菌2508已保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC，中國武漢大學校內)，保藏號為CCTCC?NO：M202029，保藏日為2002年08月03日。

本發明化合物鹿角縮酮化合物A-F(xyloketal?A-F)可從真菌2508的發酵培養液中提取分離得到，制備方法的具體步驟如下：

a.真菌2508的種子培養：

培養基按重量比為：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，瓊脂1-1.5，氯化鈉3-5，水100，制成試管斜面，挑取菌株接入斜面，30-35℃培養5-7天；

b.真菌2508的發酵培養：

發酵培養基按重量比為：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，瓊脂1-1.5，氯化鈉3-5，水100，將斜面中培養好的菌株挑入發酵培養基，于室溫25-35℃靜置1-2個月，或者于200L全自動發酵罐培養90小時；

c.將上述培養好的發酵液過濾除去菌體；

d.將發酵液加熱濃縮至原液體積的1/3-1/5，用乙酸乙酯萃取多次，濃縮乙酸乙酯萃取液，在硅膠柱中進行色譜分離，以1％-100％乙酸乙酯/石油醚為洗脫劑梯度洗脫。

e.收集8％-30％的乙酸乙酯/石油醚洗脫，純化得到Xyloketal?A-F化合物.

本發明的化合物對人臍靜脈內皮細胞胞內氧化應激影響，結果發現xyloketals能抑制AngII誘發的HUVECs胞內H₂O₂生成增多，同時也可以誘發HUVECs胞內NO生成，說明這類化合物還具有強烈的胞內抗氧化作用。因此，xyloketals系列化合物有可能通過上述有益機制，影響心腦血管疾病發生發展過程密切相關的血管重構(vascular?remodeling)。

下面結合實施例對本發明作進一步說明。

附圖說明

圖1是預孵不同濃度Xyloketal?B對KCl引起大鼠胸主動脈環收縮反應的影響；

圖2是預孵Xyloketal?B(20μM)和L-NAME(100μM)對Phe誘發的去內皮血管環收縮反應的影響；