[發(fā)明專利]用于骨質(zhì)疏松癥的RNA干擾載體及大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810027297.5
• 申請日: 2008-04-09
• 公開（公告）號: CN101555487A
• 公開（公告）日: 2009-10-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張麗蓉
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東藥學(xué)院
• 主分類號: C12N15/86
• 分類號: C12N15/86;C12N15/11;C12N5/10;A61K48/00;A61P19/10
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司
• 代理人: 劉宇峰

1、一種用于骨質(zhì)疏松癥的RNA干擾載體，其特征在于：

在基于慢病毒的短鏈發(fā)夾RNA表達(dá)的骨架質(zhì)粒中，引入以過氧化物酶體增殖子激活受體γ即PPARγ為作用靶點的可表達(dá)出短鏈發(fā)夾RNA即shRNA的DNA片段，構(gòu)建為慢病毒表達(dá)載體(lentiviral?expression?vector)；

該質(zhì)粒含有U6啟動子，該啟動子是DNA依賴的RNA聚合酶，通過Xhol和Hpal兩個酶切位點在U6啟動子后引入可表達(dá)出短鏈發(fā)夾RNA的DNA片段，該DNA片段的雙鏈序列分別為SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2，以便在U6啟動子作用下表達(dá)短鏈發(fā)夾RNA；

并且，在插入DNA片段的下游是CMV(巨細(xì)胞病毒)啟動子控制的GFP(綠色熒光蛋白)基因，由于短鏈發(fā)夾RNA與GFP共表達(dá)，以致可通過檢測GFP的表達(dá)以方便觀察短鏈發(fā)夾RNA表達(dá)的情況；

所構(gòu)建的RNA干擾載體可表達(dá)針對PPARγ的特異性短鏈發(fā)夾RNA，從而下調(diào)PPARγ的表達(dá)。

2、用如權(quán)利要求1所述的RNA干擾載體轉(zhuǎn)染的大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞。