[發(fā)明專利]檢測抗癲癇藥物過敏反應(yīng)相關(guān)抗原基因型的試劑及臨床應(yīng)用方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810026919.2
• 申請日: 2008-03-21
• 公開（公告）號: CN101353698A
• 公開（公告）日: 2009-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 廖衛(wèi)平;石奕武;高玫梅
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 廣州廣信知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 張文雄

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于檢測抗癲癇藥物過敏反應(yīng)相關(guān)抗原基因型的試劑及其 臨床應(yīng)用方法，是一種利用PCR-SSP(序列特異性引物)檢測抗癲癇藥物過敏反 應(yīng)相關(guān)抗原基因型的方法。屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

抗癲癇藥物是引起皮膚型不良反應(yīng)(cutaneous?adverse?drug?reactions， cADRs)的常見因素之一。cADRs包括輕度的斑丘疹以及嚴(yán)重危及生命的皮膚反應(yīng)， 如Stevens-Johnson綜合癥(SJS)、中毒性表皮壞死松解癥(TEN)及藥物超敏綜 合癥(HSS)。皮膚型不良反應(yīng)影響健康，嚴(yán)重危及生命的皮膚反應(yīng)的發(fā)生概率大 約為1∶10,000，致死率達到30％以上，其中SCR/TEN的致死率高達40％。超過90％ 的嚴(yán)重皮膚反應(yīng)發(fā)生在用藥后的兩個月。

抗癲癇藥物如卡馬西平(carbamazepine，CBZ)，苯巴比妥(phenobarbital)， 苯妥英(phenytoin)及拉莫三嗪(lamotrigine)均與嚴(yán)重皮膚反應(yīng)相關(guān)，其中 卡馬西平是一線抗驚撅藥物，也是一種情緒穩(wěn)定劑，主要用于癲癇及躁狂癥的治 療，也用于精神分裂癥及三叉神經(jīng)的治療。其中卡馬西平是引起不良皮膚反應(yīng)的 最常見因素。在新使用卡馬西平的個體中發(fā)生不良反應(yīng)的概率為1∶1,000～1∶ 10,000。

美國FDA近期通知醫(yī)務(wù)人員，使用卡馬西平可導(dǎo)致危險的甚至致命的皮膚反 應(yīng)(Stevens?Johnson綜合征和中毒性表皮壞死松解癥)，在有特定人類白細(xì)胞 抗原(HLA)等位基因HLA-B*1502的患者中更常見。該等位基因幾乎只見于有亞 洲地區(qū)(包括南亞的印度)血統(tǒng)的患者，如中國漢族人種中HLA-B*1502的比率高 達14.5％，歐洲人種的概率很低，只有1-2％^[8](Lonjou?et?al.，2006)。中國裔、東 南亞裔及印度裔已占了全球人口的約1/2，且其后嗣也遍布?xì)W美各地，因此卡馬 西平引發(fā)Stevens-Johnson綜合癥候群確實可說是一全球性問題。如果患者有 HLA-B*1502流行地區(qū)的血統(tǒng)，如中國裔、東南亞裔及印度裔，在開始卡馬西平治 療前應(yīng)篩查HLA-B*1502等位基因，以減低抗癲癇藥物的高風(fēng)險性。

近來的研究表明，在中國或亞洲人種中HLA-B*1502和卡馬西平導(dǎo)致的SJS 相關(guān)性強。HLA-B位點分型中，順序特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)(PCR-SSP)方法是 最常用的技術(shù)，該技術(shù)操作簡單，特異性高。盡管國外已經(jīng)有利用PCR-SSP技術(shù) 進行HLA-B分型的試劑盒，但該試劑盒主要用于腎移植及骨髓移植。而且由于價 格高，使用該試劑盒時檢測位點多，程序復(fù)雜，因此，不適用于檢測抗癲癇藥物 引起過敏反應(yīng)相關(guān)抗原。

綜上所述，在服用卡馬西平等抗癲癇藥物之前，對患者進行HLA-B*1502的分 型檢測，從而降低高危藥物的危險性，是非常有必要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個目的，是為了提供一種用于檢測抗癲癇藥物過敏反應(yīng)相關(guān)抗 原基因型的試劑。

本發(fā)明的第二個目的，是為了提供一種用于檢測抗癲癇藥物過敏反應(yīng)相關(guān)抗 原基因型的試劑的臨床應(yīng)用方法。

本發(fā)明的第一個目的可以通過采取如下措施達到：

檢測抗癲癇藥物過敏反應(yīng)相關(guān)抗原基因型的試劑，其特征是：

1)包括Taq酶、七聯(lián)管和PCR引物；

2)PCR引物如序列表SEQ?ID№：1所示。

本發(fā)明的第一個目的還可以通過采取如下措施達到：

本發(fā)明的一種實施方式是：序列表SEQ?ID№：1所示的PCR引物包括四對該 序列特異性引物及二對內(nèi)參引物，適用于以人外周血或其它組織抽提的gDNA為模 板進行PCR擴增。

本發(fā)明的一種實施方式是：序列表SEQ?ID№：1所示的PCR引物系利用序列 特異性引物PCR-SSP，根據(jù)HLA-B序列設(shè)計而成。

本發(fā)明的一種實施方式是：所述七聯(lián)管可以為12或24個7聯(lián)管兩種包裝，每 個七聯(lián)管做一人份量，七聯(lián)管的最左邊為第一反應(yīng)管，從左至右依此為二至七反 應(yīng)管，于-20℃保存。

本發(fā)明的一種實施方式是：所述Taq酶包括12μl和24μl兩種規(guī)格，濃度為 5U/μl，于-20℃保存。

本發(fā)明的第二個目的可以通過采取如下措施達到：

檢測抗癲癇藥物過敏反應(yīng)相關(guān)抗原基因型的試劑的臨床應(yīng)用方法，其特征在 于：