[發明專利]半乳糖基化人血清白蛋白融合干擾素的制備及應用

無效

• 申請號: 200810021401.X
• 申請日: 2008-07-31
• 公開（公告）號: CN101328220A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發明（設計）人: 張榮軍;蔣孟軍;蔡剛明;周堯遠;張波;顧曉波;周杏琴;曹國憲;包建東
• 申請（專利權）人: 江蘇省原子醫學研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K14/555;C07K1/113;A61K38/21;A61P1/16;A61P31/12
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術領域

本發明涉及一種半乳糖基化修飾的融合干擾素，屬于靶向生物藥物技術領域。

背景技術

我國是個人口大國，同時也是一個肝病大國，各類肝臟疾病病人很多。我國HBV攜帶率高達10％～13％，其中約有50％轉為慢性乙肝病人，在這些慢性乙肝病人中，又有約25％～40％病人最終將死于肝硬化或合并肝癌；HCV感染率為3.2％，約為4200萬人，HCV感染的慢性化率極高，可達50％～85％，經過20年的感染，大約10％～30％可發展為肝硬化，其中又約有3％～10％可演變為肝細胞癌。

目前，病毒性肝炎的治療尚無特效藥，主要采用α-干擾素(Interferonα，IFN-α)、核苷類抗病毒藥和各類中成藥(主要是免疫增強劑)等。IFN-α是哺乳動物細胞誘導物誘導下產生的一種特異糖蛋白，它能夠抑制病毒在細胞內的增殖，加強巨噬細胞的吞噬作用和對癌細胞的殺傷作用，在臨床上已廣泛用于病毒性肝炎和腫瘤等的治療(Hofnagle?JH.Digestion?1998；59：563-578)。但普通IFN由于其在體內極易被蛋白水解酶降解，生物半衰期較短，患者需多次重復給藥(一般每次肌肉注射IFN300～500萬單位，隔日1次，連續應用6～12個月)，這不僅增加了患者因多次注射帶來的痛苦，加重了患者的經濟負擔，也較易導致副反應的發生，不利于治療，限制了其臨床的應用。

為了克服普通IFN的上述缺點，國內外學者采用緩釋劑型、化學修飾手段(如用PEG等)和基因工程融合表達等手段對普通IFN進行修飾，以延長其生物半衰期，增長其藥效時間，減少注射的次數。目前較為成功的長效IFN有：(1)羅氏和先靈葆雅制藥公司生產的聚乙二醇化干擾素(PEG-IFNα)，如Pegasys(聚乙二醇化干擾素-2a)和PEG-Intron(聚乙二醇化干擾素-2b)(McHutchisonJG，Fried?MW.ClinLiver?Dis，2003，7：149-161；Mager?DE，Neuteboom?B，Jusko?WJ.Pharm?Res?2005；22：58-61)。PEG-IFNα不僅具有較強的抗病毒活性，還具有較長的生物半衰期，只需一周皮下注射180μg?PEG-IFNα一次，大大方便了醫患雙方。(2)美國HGS(Human?Genome?Science)公司率先研制的融合IFN(多為HSA-IFN)，它是采用基因重組技術，將人血清白蛋白(HSA)基因與人IFN基因進行融合，并與表達載體連接后引入酵母菌，經酵母發酵生產GHSA-IFN(又名Albuferon)。Albuferon臨床前藥代動力學實驗研究結果表明其半衰期為142小時，推薦每2-4周給藥一次；I期和II期臨床藥代動力學研究結果均表，Albuferon每二周注射一次后，血清Albuferon的濃度持續高于普通IFN和PEG-IFN，在第二次注射后的4周時仍能在測定出血清中Albuferon，其平均半衰期為148小時；而Pegasys的平均半衰期為80小時(50-140小時)，Peg-Intron為40小時(22-60小時)，普通IFN僅為4～6小時(Osborn?B，Olsen?H，Nardelli?B，etal.J?Pharmacol?Exp?Ther?2002；303：540-548；Balan?V，Nelson?DR，Sulkowski?MS，etal.Antivir?Ther.2006；11：35-45；Bain?VG，Kaita?KD，Yoshida?EM，et?al.J?Hepatol2006；44：671-678；HGS?Website：http://www.hgsi.com/products/albuferon.html)。國內也已有多家單位成功研制了GHSA-IFN，并申請了專利(金堅，等.中國專利CN200610038790.8和CN200610038791.2)。

但是普通IFN和長效IFN在肝臟中的最大分布均還不到給藥劑量的10％，肝靶向性均不高，臨床上為達到治療病毒性肝炎的效果常常需要加大給劑量，這不僅加重了患者的經濟負擔，也較易導致副反應的發生，致使療效也不夠理想，因此有必要增加IFN的肝靶向性，提高IFN在肝臟中的濃度。