[發明專利]用于控制細胞外基質礦化的方法、基于上述方法的治療方法以及其中使用的藥物

無效

• 申請號: 200780050102.2
• 申請日: 2007-11-16
• 公開（公告）號: CN101589138A
• 公開（公告）日: 2009-11-25
• 發明（設計）人: 約翰內斯·彼得魯斯·托馬斯·馬里亞·范萊文;赫爾曼納斯·約翰內斯·馬爾科·艾肯
• 申請（專利權）人: 鹿特丹伊拉斯姆斯大學醫療中心
• 主分類號: C12N5/06
• 分類號: C12N5/06;A61B17/58
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 吳貴明;張 英

1.一種選擇用于控制對象的組織中的細胞外基質礦化的候選治療劑的方法，所述方法包括以下步驟：

a)在支持細胞外基質形成和基質成熟的條件下將產生細胞外基質的來自所述組織的細胞暴露于檢測化合物；

b)確定至少一種基因響應所述暴露在所述細胞中表達，其中所述基因選自：

A組，由編碼以下物質的基因組成：血小板反應蛋白1；V型膠原α1；XVI型膠原α1；VIII型膠原α2；膠原三股螺旋重復蛋白1；透明質酸和蛋白聚糖連接蛋白1；硫酸軟骨素蛋白多糖2(多功能蛋白聚糖)；潛在的轉化生長因子β結合蛋白2；雙糖鏈蛋白多糖；基質金屬肽酶2；成骨細胞特異性因子2、成骨細胞特異性因子；抗“衰老關鍵蛋白”抗體；SPOCK1、富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白/骨連蛋白、cwcv和kazal樣結構域蛋白聚糖(睪丸蛋白聚糖)；以及具有1型血小板反應蛋白基序的ADAM金屬肽酶；和/或

B組，由編碼以下物質的基因組成：CD248抗原、內皮唾酸蛋白；彈性微原纖維界面蛋白2；matrilin?2；異連蛋白α；IV型膠原α6；巢蛋白2(骨巢蛋白)；乳突淋蛋白、蛋白聚糖樣硫酸糖蛋白；C型凝集素結構域家族3成員B；V型膠原α3；以及TIMP金屬肽酶抑制劑4；以及

c)在所述至少一種基因在所述細胞中的表達作為所述暴露的直接結果被調節的情況下，選擇所述檢測化合物作為候選治療劑來控制在對象的組織中細胞外基質的礦化。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述至少一種基因的表達通過全基因組表達譜確定。

3.根據權利要求1所述的方法，其中，所述至少一種基因的表達通過測量轉錄自所述至少一種基因的mRNA水平確定。

4.根據權利要求1所述的方法，其中，所述至少一種基因的表達通過所述細胞或所述細胞外基質的蛋白質分析確定。

5.根據前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述用于控制礦化的藥劑是用于刺激礦化、骨愈合、骨形成和/或用于治療骨質疏松的藥劑。

6.根據權利要求5所述的方法，其中，所述細胞是成骨細胞。

7.根據權利要求5或6所述的方法，其中，當在權利要求1中所述的A組中的至少一種基因被下調和/或當在權利要求1中所述的B組中的至少一種基因被上調時，所述檢測化合物被確定為候選治療劑。

8.根據權利要求5-7中任一項所述的方法，其中，所述檢測化合物選自由卵泡抑素的功能類似物、活化素A抑制劑、活化素A抑制劑的誘導劑以及II型活化素受體的拮抗劑組成的組。

9.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中，所述用于控制礦化的藥劑是用于預防礦化或用于治療鈣化病癥的藥劑。

10.根據權利要求9所述的方法，其中，所述鈣化病癥是病理性鈣化，所述病理性鈣化選自由動脈粥樣硬化性鈣化，轉移性肺鈣化，心臟瓣膜鈣化，以及伴隨腱炎的關節內鈣化、關節炎、滑囊炎、骨刺、皮膚骨化、腎結石、骨化性肌炎、肺骨化、白內障、雙側紋狀體蒼白球齒狀體鈣質沉著癥、神經源性異位骨化以及骨肉瘤組成的組。

11.根據權利要求9或10所述的方法，其中，所述細胞是血管平滑肌細胞。

12.根據權利要求9-11中任一項所述的方法，其中，當在權利要求1中所述的A組中的至少一種基因被上調和/或當在權利要求1中所述的B組中的至少一種基因被下調時，所述檢測化合物被確定為候選治療劑。

13.根據權利要求9-12中任一項所述的方法，其中，所述檢測化合物選自由活化素A的功能類似物、活化素A的內源性誘導劑以及II型活化素受體的激動劑組成的組。

14.一種細胞培養礦化模型，包括：

在支持細胞外基質形成和基質成熟的條件下產生細胞外基質的細胞的培養物；

檢測化合物，以及

用于確定作為在所述培養物中的所述細胞暴露于所述檢測化合物的結果的如在權利要求1中所述的A組和/或B組基因在所述細胞中的表達水平的手段和方法。

15.一種用于預防礦化或用于治療鈣化病癥的治療劑，其中，所述候選治療劑是活化素A。