[發明專利]用于改良纖維素的酶法水解的酶組合物和方法

無效

• 申請號: 200780030237.2
• 申請日: 2007-06-22
• 公開（公告）號: CN101501206A
• 公開（公告）日: 2009-08-05
• 發明（設計）人: J·S·托蘭;T·懷特;J·托馬斯黑克
• 申請（專利權）人: 埃歐金能源公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12N9/24;C12N9/42
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種用于酶法水解纖維素以從預處理的木質纖維素原料產生含葡萄糖的水解產物的酶組合物，所述酶組合物包含纖維素酶、一種或多種β-葡萄糖苷酶以及用于將所述β-葡萄糖苷酶結合至所述預處理的木質纖維素原料上的粘合劑，其中所述水解通過以下步驟實現：

(i)用所述酶組合物部分地水解所述預處理的木質纖維素原料的水性漿液以產生含有葡萄糖、葡萄糖寡聚體或它們的組合的水解漿液，以及包含纖維素和木素的未水解纖維固體；

(ii)從所述水解的漿液分離出所述未水解的纖維固體以產生分離的纖維固體，其中所述纖維素酶和所述一種或多種β-葡萄糖苷酶與所述分離的纖維固體結合；

(iii)將所述分離的纖維固體再懸浮于一種水性溶液中以產生再懸浮漿液；以及

(iv)繼續水解所述再懸浮漿液以產生含葡萄糖的水解產物。

2.根據權利要求1的酶組合物，其中所述粘合劑為一種可操作連接至所述一種或多種β-葡萄糖苷酶上的碳水化合物結合模塊。

3.根據權利要求2的酶組合物，其中所述碳水化合物結合模塊是一種纖維素結合域。

4.根據權利要求1的酶組合物，其中所述纖維素酶由曲霉屬(Aspergillus)、腐質霉屬(Humicola)、木霉屬(Trichoderma)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、喜熱裂孢菌屬(Thermobifida)或它們的組合產生。

5.根據權利要求4的酶組合物，其中所述纖維素酶由木霉屬產生。

6.根據權利要求1的酶組合物，其中所述一種或多種β-葡萄糖苷酶由曲霉屬(Aspergillus)、腐質霉屬(Humicola)、木霉屬(Trichoderma)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、喜熱裂孢菌屬(Thermobifida)或它們的組合產生。

7.根據權利要求6的酶組合物，其中所述一種或多種β-葡萄糖苷酶由木霉屬或曲霉屬產生。

8.根據權利要求3的酶組合物，其中所述纖維素結合域是家族I纖維素結合域。

9.根據權利要求3的酶組合物，其中所述纖維素結合域是細菌或真菌纖維素結合域。

10.根據權利要求3的酶組合物，其中所述一種或多種β-葡萄糖苷酶包含一種將所述纖維素結合域可操作地連接于所述β-葡萄糖苷酶的接頭。

11.根據權利要求1的酶組合物，其中所述一種或多種β-葡萄糖苷酶是天然存在的。

12.根據權利要求1的酶組合物，其中所述一種或多種β-葡萄糖苷酶是基因修飾的融合蛋白。

13.根據權利要求3的酶組合物，其中存在于所述酶組合物中的總β-葡萄糖苷酶的約75％至約100％(w/w)包含纖維素結合域。

14.根據權利要求13的酶組合物，其中存在于所述酶組合物中的總β-葡萄糖苷酶的約90％至約100％(w/w)包含纖維素結合域。

15.根據權利要求1的酶組合物，其中所述纖維素酶包括選自纖維素酶CBHI和CBHII及它們的組合的纖維二糖水解酶，以及選自纖維素酶EGI、EGII、EGIV、EGV和EGVI及它們的組合的內切葡聚糖酶。

16.根據權利要求1的酶組合物，其中在所述部分水解步驟(步驟(i))中，存在于所述酶組合物中的總纖維素酶的約75％至約100％(w/w)與存在于所述水性漿液中的纖維固體結合。