[發明專利]肌病的診斷方法

無效

• 申請號: 200780021728.0
• 申請日: 2007-06-12
• 公開（公告）號: CN101522910A
• 公開（公告）日: 2009-09-02
• 發明（設計）人: 雷約·拉克索寧;馬泰·奧倫西克;泰爾霍·萊赫蒂邁基;漢努·派瓦
• 申請（專利權）人: 佐拉生物科學有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/92;G01N33/49;G06F19/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司
• 代理人: 劉曉東;吳亦華

技術領域

本發明涉及用于確定他汀類(statin)所誘導肌病的診斷方法。該方法尤其適用于確定警告、早期征兆以及癥狀性肌病。該方法包括收集脂質生物學標志物譜并將其與參照脂質組學標志物進行比較。該方法還包括所述生物標志物譜的化學計量建模和統計分析。本發明還涉及用于實施確定他汀類所誘導肌病之診斷方法的試劑盒。

背景技術

高水平的血液膽固醇是導致動脈粥樣硬化和心血管疾病的主要風險因素之一。臨床上可以用3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A還原酶抑制劑(合稱他汀類)使升高的膽固醇水平降低。他汀類已在大量的臨床試驗中顯示出有效降低膽固醇血液水平。當前有大量不同的他汀類存在。高膽固醇值在歐洲和美國非常常見，使用他汀類來降低膽固醇值正顯著增加。在歐盟成員國中，他汀類的使用從1997年至2002年平均增長了30％。

最近的臨床數據顯示，他汀類治療具有副作用。與他汀類有關的最主要且最重要的副作用是肌病。肌病是多種肌肉相關問題的總稱，所述肌肉相關問題例如肌肉疼痛(肌痛)、衰弱和痙攣(Paul?D.Thompson等，Am?J?Cardiol?2006，97(增刊)：69C-76C)。他汀類誘導肌病的確切機制尚不清楚。最近的研究顯示，臨床可接受劑量的阿托伐他汀和辛伐他汀導致血漿泛醌的水平降低。泛醌是參與線粒體電子傳遞并因此參與組織能量代謝的輔酶。他汀類(如阿托伐他汀和辛伐他汀)對骨骼肌明顯具有影響(等，Clin?Pharmacol?Ther?2005：78：60-8)。

代謝組學是致力于系統研究細胞、組織和體液(biofluid)中小分子(即代謝物)的學科。代謝物是細胞調節過程的終產物，其水平可被視為生物系統針對遺傳或環境變化的放大反應。幾十年來，臨床醫生已依賴了代謝組學中包含的小部分信息，例如測量葡萄糖以監測糖尿病以及測量膽固醇以監測心血管健康。已開發新的精密的代謝組學分析平臺和信息工具以提供廣泛和靈敏的代謝組測量。

已知脂質作為結構組分(例如細胞膜)、能量儲存組分以及作為信號分子起到重要作用。脂質被廣義定義為疏水或兩親性小分子，其全部或部分來源于基于碳負離子的硫酯縮合和/或基于碳正離子的異戊二烯單元縮合。脂質組學可被看作是代謝組學的子領域，其目的是通過在分子水平上測量和表征廣泛的脂質譜(脂質組學譜)來闡明與脂質有關的生物學過程。傳統的臨床脂質測量對三酰甘油、膽固醇和脂蛋白的總量進行定量。然而，血清脂質譜在分子水平上更加復雜。目前的脂質組學平臺可以對多個脂質類別的100余種不同脂質分子進行定量表征，如鞘磷脂、磷脂、固醇酯、?；视?、固醇、膽汁酸、脂肪酸、類二十烷酸和類固醇。

現今，肌病主要根據患者的癥狀進行診斷。升高的肌酸激酶(creatinekinase，CK)可用于檢測具有肌肉癥狀的患者。然而，CK水平可由于其它原因(如運動)而升高，并且其不是他汀類所誘導肌病的可靠生物學標志物。當下，尚沒有診斷非癥狀性肌病的診斷方法或臨床檢測。并且，在接受他汀類治療時無法估計患者發生肌病的風險。本發明公開了用于確定他汀類所誘導肌病的風險和早期征兆的方法。

發明概述

本發明公開了用于確定他汀類所誘導肌病的方法，其包括以下步驟

a)提供來自他汀類治療前或治療期間之個體的生物樣品；

b)從所述生物樣品收集脂質組學譜；

c)對所收集的脂質組學譜與參照脂質組學標志物進行比較，其中已通過將促炎性基因表達譜與高劑量他汀類治療相關的脂質組學譜相結合建立了所述參照脂質組學標志物。

該方法尤其適用于確定他汀類所誘導肌病的風險或早期預兆。該方法還可用于在表現出肌病臨床癥狀的個體中確定他汀類所誘導肌病。

本發明的另一方面是提供用于確定他汀類所誘導肌病的試劑盒。

附圖說明

圖1表示血清脂質組學數據的偏最小二乘判別分析(partial?leastsquares?discriminant?analysis，PLS/DA)。來自安慰劑(N＝11)、阿托伐他汀(N＝14)(A)和辛伐他汀(N＝12)(B)組治療8周后的結果，其中分析中包含132種已鑒定脂質作為變量。對于每種分子和每位受試者來說，其8周治療期后的水平通過減去治療前所有受試者的中值水平并除以相應的標準偏差來計算。在模型中使用4種潛變量(Q²＝0.46)。標簽為患者ID編號。不同組的輪廓線用于指引。潛變量(LV)1和3的分數表明特異性針對他汀類治療(LV1)的血清脂質變化以及他汀類特異性變化(LV3)。