[發明專利]一種增強土著根瘤菌固氮能力的生物源激活劑無效
| 申請號: | 200710303422.6 | 申請日: | 2007-12-28 |
| 公開(公告)號: | CN101255400A | 公開(公告)日: | 2008-09-03 |
| 發明(設計)人: | 梁志懷;魏林;羅赫榮;魏寶陽;陳玉榮;申愛榮 | 申請(專利權)人: | 湖南省植物保護研究所 |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;A01N63/02;C12R1/885 |
| 代理公司: | 長沙星耀專利事務所 | 代理人: | 寧星耀;寧岡 |
| 地址: | 410125*** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 增強 土著 根瘤菌 固氮 能力 生物 激活劑 | ||
1、一種增強土著根瘤菌固氮能力的生物源激活劑,其特征在于,采用以下方法制成:
(1)將保藏編號為CCTCC?№:M207141的哈茨木霉Trichoderma?harzianum菌株T216接種到裝有150mL液體培養基的三角瓶中,于27±1℃下轉速為150轉/分,培養60小時,作為發酵種子用;
液體培養基組分為:可溶性淀粉10g,葡萄糖20g,蛋白胨5g,KH2PO4?1g,MgSO·7H2O?0.5g,CaCO3?0.25g,(NH4)2SO4?2g,水1000mL,PH自然,經115℃滅菌15-20分鐘;
(2)發酵罐發酵:將第(1)步所得木霉菌種子培養液按10%(V/V)的接種量接入發酵罐進行發酵培養,發酵控制參數為:
溫度控制,分為兩個階段,發酵第一階段,即菌體培養階段0-72小時,26-28℃;發酵第二階段,即代謝產物生產階段72-100小時,23-25℃;
通氣量(V/V):0-20小時:1∶0.6;20-40小時:1∶0.8;40-80小時:1∶1.2,80小時以后:1∶0.6;攪拌速度:250-300rpm;
初始pH值控制為6.5-6.8,前24小時維持在初始值;
發酵罐培養基組分:1.5-2.0%麥麩汁液,0.5-1.0%葡萄糖,2.0-3.0%玉米粉,1.0-2.0%酵母膏,0.1-0.5%CaCO3,0.01-0.03%MgSO4,0.5-0.8%KH2PO4和K2HPO4,pH值為6.5-6.8,余量為水;通入蒸氣達121℃在位滅菌30分鐘;所述百分比均為重量百分比;
(3)發酵完成后,發酵液用氫氧化鈉溶液調pH為7-8,悶罐過夜,滅菌紗布真空過濾,得濾液,密封包裝,即成。
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