[發明專利]珍珠菜總皂苷抗腫瘤用途

無效

• 申請號: 200710191737.6
• 申請日: 2007-12-14
• 公開（公告）號: CN101199563A
• 公開（公告）日: 2008-06-18
• 發明（設計）人: 唐麗華;游本剛;黃榮華;潘海敏;李新章
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P35/00;A61P1/16
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司
• 代理人: 孫立冰

技術領域

本發明涉及天然藥物領域，具體涉及一種珍珠菜總皂苷的抗腫瘤用途。

背景技術

惡性腫瘤是造成人類死亡的僅次于心血管疾病的第二號殺手，隨著工業化進展和老齡人口比例的增加，腫瘤發病率近20年來呈顯著的上升趨勢。藥物治療在臨床上是最重要的治療癌癥的方法，但目前抗腫瘤藥物均有嚴重的不良反應，因此，從中藥中尋找作用顯著、毒副作用小的抗腫瘤藥物一直是國際醫藥界的重點、熱點課題。

珍珠菜，英文名：Lysimachia?clethroide?Duby，系報春花科植物虎尾珍珠菜的根或全草，味苦、辛，性平，具有清熱利濕，活血散瘀，解毒消癰之功效。國外學者從70年代開始，相繼從中分離得到槲皮素苷，山奈素，黃芪素等黃酮類化合物，國內學者近年來對其化學成分也有所研究，多數著重于其黃酮類的研究，并且已有文獻報道其黃酮類具有一定的抗腫瘤作用，因此研究者在研究中大多是提取其黃酮類，并以此作用質量控制指標。

發明內容

本發明公開了珍珠菜總皂苷的抗腫瘤用途，特別是其具有優良的抗肝癌作用。

珍珠菜總皂苷可以用文獻方法制備，也可以用下列方法制備得到：

將珍珠菜粉碎，用溶劑回流提取，過濾，濾液經回收溶媒得浸膏，浸膏加水溶解，濾過，濾液濃縮，調節pH值至4～6，然后通過大孔樹脂吸附，乙醇洗脫，蒸發除去溶劑并干燥，得珍珠菜粗提物，粗提物加水溶解，濾過，濾液用氯仿、醋酸乙酯或正丁醇萃取，減壓回收溶媒，萃取物減壓干燥即得。其中所述溶劑選自水、乙醇、丙酮、醋酸乙酯或C_1-4的脂肪族醇；所述大孔樹脂選自AB-8、D4020、NKA-9、ZTC大孔吸附樹脂或聚酰胺樹脂。溶劑優選乙醇。乙醇濃度優選30％～80％，為重量百分比。

洗脫用的乙醇濃度優選20～95％，為重量百分比。

下面是本發明的部分藥理藥效學試驗及結果，本發明藥理部分所用的藥物即珍珠菜總皂苷，由實施例1方法制備。

一、藥物的體外抗腫瘤活性

1采用MTT法測定腫瘤細胞對藥物的敏感性

采用常規MTT法測定腫瘤細胞株對藥物的敏感性。取對數生長期腫瘤細胞人乳腺癌細胞(MCF-7)、人宮頸癌細胞(Hela)、人結腸癌細胞(Caco-2)、人肝癌細胞(SMMC-7721)，用完全培養基調整細胞濃度為7×10⁴/ml，接種于96孔培養板中，100μl/孔，37℃、5％CO₂條件下培養過夜，次日進行分組：治療組加入珍珠菜總皂苷提取物(終濃度分別為3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/ml)，陽性對照組加入5-FU(25μg/ml)，100μl/孔，陰性對照組加入等體積完全培養基，每組均設6復孔，培養48h。終止培養前4h加入MTT(5mg/ml)，10μl/孔，培養結束后每孔加入酸化的10％SDS?100μl，放置過夜，于酶標儀檢測波長為570nm時的吸光度A值。

腫瘤細胞生長抑制率(Inhibition?Rate)按以下公式計算：

Inhibition?Rate(％)＝[(A_對照組-A_實驗組)/A_對照組]×100％

試驗結果：MCF-7、SMMC-7721、Hela、Caco-2細胞的抑制率分別為81.98％、91.92％、73.94％及34.16％，與陰性對照組相比具有極顯著性差異(P＜0.01)。可見珍珠菜總皂苷對肝癌的抑制效果明顯好于其它癌癥。

2藥物對SMMC-7721細胞增殖抑制作用

2.1MTT法：取對數生長期SMMC-7721細胞、Hela細胞，調整細胞濃度后接種于96孔培養板中，37℃，5％CO₂條件下培養，次日分組：給藥組加入不同濃度珍珠菜總皂苷提取物(終濃度分別為3.125、6.25、12.5、25、50、100μg/ml)，陰性對照組加入等體積生理鹽水，每組均設6復孔，分別培養24、48、72h。MTT法同上，每組均設6復孔。

試驗結果：藥物對人肝癌SMMC-7721、人宮頸癌Hela細胞株有很強的抑制作用，且作用有明顯的時間、濃度依賴性，且藥物對SMMC-7721細胞的增殖抑制效果明顯好于Hela細胞。