[發(fā)明專利]一種PEG化重組改構(gòu)人腫瘤壞死因子的分離純化方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710175657.1 | 申請日： | 2007-10-10 |
| 公開（公告）號： | CN101407547A | 公開（公告）日： | 2009-04-15 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張樹祥;熊國裕 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京星昊嘉宇醫(yī)藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K17/08 | 分類號： | C07K17/08;C07K1/18 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100176北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 peg 重組 改構(gòu)人 腫瘤 壞死 因子 分離 純化 方法 | ||
1、一種PEG化重組改構(gòu)人腫瘤壞死因子的分離純化方法，其特征在于包括如下步驟：
(1)采用常規(guī)的方法對發(fā)酵培養(yǎng)所獲得的誘導表達菌進行裂菌獲得rhTNF-α粗品；
(2)在rhTNF-α粗品中加入2-4倍于其質(zhì)量的活化PEG，于HEPES的緩沖液中，在4℃下，進行共價反應0.25-2小時；
(3)將步驟2所得的PEG化rhTNF-α加入到已處理好的DEAE-離子交換柱上，用平衡緩沖液淋洗至樣品吸收值至基線，改用含NaCl的平衡緩沖液洗脫，收集目的峰產(chǎn)物，即為本發(fā)明的PEG化rhTNF-α。
2、如權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的活化PEG可以是NHS-PEG2、PEG-MAL、SPA-PEG、NHS-PEG-MAL中的任一種。
3、如權(quán)利要求2所述的方法，其特征是所述的活化PEG為NHS-PEG-MAL。
4、如權(quán)利要求1、2或3所述的方法，其特征是所述的PEG優(yōu)選為PEG600。
5、如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的NaCl緩沖液為0.01-1M的NaCl平衡緩沖液。
6、如權(quán)利要求5所述的方法，NaCl緩沖液優(yōu)選為0.075M的NaCl平衡緩沖液。
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