[發明專利]一種化合物在防治黃瓜枯萎病和番茄灰霉病中的應用

無效

• 申請號: 200710156836.0
• 申請日: 2007-11-19
• 公開（公告）號: CN101283684A
• 公開（公告）日: 2008-10-15
• 發明（設計）人: 申屠旭萍;俞曉平;王為民;董勝張
• 申請（專利權）人: 中國計量學院
• 主分類號: A01N43/54
• 分類號: A01N43/54;A01P3/00;C07D239/10;C12P19/60;C12R1/465
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技術領域

本發明涉及微生物技術領域，特別是涉及生防放線菌——淀粉酶產色鏈霉菌D的培養及其代謝產物的分離與應用。

背景技術

放線菌(Actinomycetes)與人類的關系極為密切。據統計，在已發現的抗生素中，有61.7％為放線菌所產生。常用的抗生素除青霉素和頭孢霉素類外，絕大多數都是放線菌的產物。土壤是放線菌棲居的重要場所，從土壤中獲得具有高效抗菌活性的放線菌產生抗生素是目前世界范圍內研制開發新醫藥和新農藥必不可少的基礎工作。

目前對植物病害的防治，主要采用化學農藥殺滅病原菌，但化學農藥對人畜的毒副作用和殘留問題至今仍難以有效的解決。利用放線菌產生的抗病原真菌的活性物質進行植物病原真菌病害的生物防治，則具有周期短、易于研究、便于生產、無毒無害等優點。

本發明從杭州的土壤中分離到一株生防放線菌，并對此生防放線菌發酵代謝產物中的抗菌成分進行分離，得到了主要活性成分，經四大光譜分析，明確了其結構式。該發明為微生物源農藥的進一步研制和開發提供優良的出發菌株和生物活性化合物。

發明內容

本發明的目的是針對化學農藥不安全與微生物源農藥種類較少的不足，提供一種從杭州土壤中分離篩選出的放線菌-淀粉酶產色鏈霉菌D；本發明的另一目的是提供利用該菌株通過發酵提取其代謝產物制備成防治部分植物真菌病害的微生物農藥及其制備方法。

本發明淀粉酶產色鏈霉菌的分離、篩選與鑒定：

是于2006年8月在浙江杭州臨安天目山采集的土樣中，經分離、培養、發酵、活性測定以及對抑制植物真菌病害病原菌有效菌株的篩選等步驟獲得并保存；經微生物分類學鑒定為淀粉酶產色鏈霉菌(Streptomycesdiastatochromogenes)，定名為淀粉酶產色鏈霉菌(Streptomycesdiastatochromogenes)D。該菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏日期2007年5月25日，保藏登記號CGMCC?No.2060。

淀粉酶產色鏈霉菌D顯微形態特征：孢子絲直、鉤狀、松散螺旋形，孢子長圓、橢圓或卵圓形。

本發明所述的淀粉酶產色鏈霉菌D，經發酵提取可獲得對部分植物真菌病害病原菌具有抑制作用的活性化合物[2，4-Dioxo-1-(3，4，5-trihydroxy-6-hydroxymethyl-tetrahydro-pyran-2-yl)-1，2，3，4-tetrahydro-pyrimidin-5-yl]-methylamino-acetic?acid。

本發明目的通過以下技術方案來實現：

一種防治番茄灰霉病和黃瓜枯萎病等植物真菌病害微生物農藥的制備方法，按以下步驟進行：

(1)菌種的活化培養：將分離保存的淀粉酶產色鏈霉菌D菌種移至試管內高氏一號斜面上，在28℃±1℃條件下，培養至試管斜面長滿孢子；

(2)發酵培養：發酵培養液為每1000mL中含有黃豆餅粉20g，玉米粉15g，麩皮10g，NH₄NO₃3g，(NH₄)₂SO₄5g，CaCO₃5g，MgSO₄1g，滅菌，待冷卻至40℃，在無菌條件下接種淀粉酶產色鏈霉菌D至發酵培養液中，在28℃±1℃條件下，培養5天；

(3)發酵物提取：發酵完畢，收集發酵液，按常規化學方法提取、層析，分離純化獲得活性化合物[2，4-Dioxo-1-(3，4，5-trihydroxy-6-hydroxymethyl-tetrahydro-pyran-2-yl)-1，2，3，4-tetrahydro-pyrimidin-5-yl]-methylamino-acetic?acid，該化合物分子式為C₁₃H₁₉O₉N₃，結構式見下式；

(4)將此活性化合物配以農用藥物輔料，制備成多種劑型的農用藥物。

本發明的有益效果：

一是本發明從杭州土壤分離篩選出代謝物產量高、并對部分植物真菌病害病原菌具有較強抑制作用的淀粉酶產色鏈霉菌D，這為農業上防治植物真菌病害病原菌提供了一種微生物菌株；