[發(fā)明專(zhuān)利]制備雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原的新原料及其篩選方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710113727.0
• 申請(qǐng)日: 2007-08-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101377489A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張訓(xùn)海
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 張訓(xùn)海
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/531
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/531;G01N33/569;G01N33/561
• 代理公司: 蚌埠鼎力專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
• 代理人: 倪波

1、制備雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原的新原料，其特征在于：采用馬立克氏病疫苗培養(yǎng)廢棄液作為制備雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原的原料。

2、制備雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原新原料的篩選方法，其特征在于：應(yīng)用免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)和/或蛋白質(zhì)電泳分析技術(shù)對(duì)馬立克氏病疫苗株合格培養(yǎng)后的廢棄液進(jìn)行檢測(cè)評(píng)價(jià)和篩選。

3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于：所述的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)和/或蛋白質(zhì)電泳分析技術(shù)是指采用瓊擴(kuò)試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)分析和/或結(jié)合固定化蛋白質(zhì)的免疫學(xué)測(cè)定進(jìn)行檢測(cè)評(píng)價(jià)與篩選。

4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的篩選方法，其特征在于：所述瓊擴(kuò)試驗(yàn)篩選法的具體步驟如下：

a.對(duì)不同血清型馬立克氏病毒疫苗株進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，收集其細(xì)胞培養(yǎng)后的廢棄液；

b.將疫苗株細(xì)胞培養(yǎng)棄液或棄液中的主要可溶性分泌物濃縮10～100倍；

c.以單純馬立克氏病毒致病株感染雞或細(xì)胞而制備的馬立克氏病毒瓊擴(kuò)陽(yáng)性抗原和馬立克氏病毒瓊擴(kuò)陽(yáng)性抗體，作為陽(yáng)性反應(yīng)體系的對(duì)照，采用瓊擴(kuò)試驗(yàn)并以馬立克氏病毒瓊擴(kuò)陽(yáng)性抗體檢測(cè)上述各濃縮液中馬立克氏病毒抗原的有無(wú)及其含量；

d.能夠與馬立克氏病毒陽(yáng)性抗體形成明顯的瓊擴(kuò)沉淀線，并且該沉淀線與陽(yáng)性反應(yīng)體系或MDV致病株的沉淀線完全吻合并能融合的濃縮液，判定為馬立克氏病毒抗原陽(yáng)性，其所源于的疫苗株為馬立克氏病毒抗原生產(chǎn)的候選株；

e.以上述檢測(cè)結(jié)果作為初選依據(jù)，實(shí)地收集候選疫苗株的細(xì)胞培養(yǎng)棄液，即已收獲疫苗病毒后的細(xì)胞培養(yǎng)液，按b、c和d步驟對(duì)疫苗生產(chǎn)棄液中有無(wú)MDV抗原再進(jìn)行檢測(cè)與含量評(píng)價(jià)，以單位棄液中的目的抗原含量高者為佳，進(jìn)而最終確定出雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原的生產(chǎn)原料。

5、根據(jù)權(quán)利要求1所述制備雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原的新原料，其特征在于：以馬立克氏病毒血清1型的CVI988/Rispens株及其低代次種毒進(jìn)行疫苗毒的增殖培養(yǎng)，在收獲合格的感染細(xì)胞后，其病毒培養(yǎng)的上清液即培養(yǎng)后的廢棄液，作為雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原制備的原料。

6、根據(jù)權(quán)利要求1所述制備雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原的新原料，其特征在于：以馬立克氏病毒血清3型的火雞皰疹病毒Fc-126株及其低代次種毒進(jìn)行火雞皰疹病毒疫苗的增殖培養(yǎng)，在收獲合格的感染細(xì)胞后，其上清廢棄液作為雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原制備的原料。

7、根據(jù)權(quán)利要求1所述制備雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原的新原料，其特征在于：以CVI988作為重組疫苗的載體，若其增殖培養(yǎng)液中分泌有一定含量的目的馬立克氏病毒抗原，其細(xì)胞培養(yǎng)上清廢棄液作為雞馬立克氏病毒感染檢測(cè)抗原制備的原料。