[發明專利]HIV調節/輔助蛋白的融合蛋白

無效

• 申請號: 200710103952.6
• 申請日: 2003-05-14
• 公開（公告）號: CN101108882A
• 公開（公告）日: 2008-01-23
• 發明（設計）人: 保羅·豪利;桑賈·利勒;伊娃·費爾德
• 申請（專利權）人: 巴法里安諾迪克有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/86;A61K38/16;A61K39/12;A61K48/00;A61P31/18
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所
• 代理人: 張紅春

1.融合蛋白，其包含選自Vif，Vpr，Vpu，Vpx，Rev和Tat中的至少三種 HIV蛋白的氨基酸序列或者一種或多種所述蛋白的氨基酸序列的衍生物， 其中所述融合蛋白在形成該融合蛋白的HIV蛋白氨基酸序列之間不包含細 胞蛋白酶的特定裂解序列，所述序列將導致產生具有天然N和C末端的HIV 蛋白，且當將融合蛋白中的氨基酸序列的相應部分和HIV分離株HXB2R (genebank登陸號K03455)中的各HIV蛋白的氨基酸序列相比較時，其中HIV 蛋白的氨基酸序列的衍生物是顯示至少50％同源性的氨基酸序列。

2.權利要求1的融合蛋白，其中所述同源性是至少80％。

3.融合蛋白，其包含選自Vif，Vpr，Vpu，Vpx，Rev和Tat中的至少三種 HIV蛋白的氨基酸序列或者一種或多種所述蛋白的氨基酸序列的衍生物， 其中所述融合蛋白在形成該融合蛋白的HIV蛋白氨基酸序列之間不包含細 胞蛋白酶的特定裂解序列，所述序列將引發產生具有天然N和C末端的HIV 蛋白，并且其中作為所述融合蛋白一部分的各HIV蛋白衍生物是其中已刪 除、插入或取代不多于10個氨基酸而獲得的活性降低或完全不具活性的 HIV蛋白。

4.權利要求1-3之一的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含選自Vpr，Vif， Vpx，Vpu，Rev和Tat的4個、5個或者全部的HIV蛋白或一種或多種所述 HIV蛋白的氨基酸序列的衍生物。

5.權利要求1-4之一的融合蛋白，其包含HIV蛋白Vif，Vpr，Vpu，Rev 和Tat的氨基酸序列或一種或多種所述蛋白的氨基酸序列的衍生物。

6.權利要求1-5之一的融合蛋白，其中至少兩種所述HIV蛋白的氨基 酸序列互相融合而無需其它氨基酸。

7.權利要求1-6之一的融合蛋白，其中至少兩種所述HIV蛋白的氨基 酸序列被至少一種其它的氨基酸分開。

8.權利要求1-7之一的融合蛋白，其中至少一種所述HIV蛋白的氨基 酸序列和融合配偶體融合，所述融合配偶體不是選自Vif，Vpr，Vpx，Vpu， Rev，Tat和Nef的HIV蛋白。

9.編碼權利要求1-8之一的融合蛋白的核酸。

10.權利要求9的核酸，其中所述核酸是DNA。

11.權利要求10的核酸，其中該融合蛋白從所述DNA中的表達受選 自真核細胞，原核細胞和病毒啟動子的調控元件控制。

12.權利要求11的核酸，其中所述病毒啟動子是痘病毒啟動子。

13.權利要求9-12之一的核酸，其中所述核酸還包含選自Gag，Pol和 Env中至少一種的其它HIV蛋白的編碼序列。

14.權利要求13的核酸，其中所述核酸包含HIV?Gag，Pol和Env蛋白 的編碼序列。

15.包含權利要求9-14之一的核酸的載體。

16.權利要求15的載體，其中所述載體是病毒載體。

17.權利要求16的載體，其中所述病毒載體是痘病毒載體，具體是痘 苗病毒載體。

18.權利要求17的載體，其中所述痘苗病毒載體是改良的安卡拉痘苗 病毒(MVA)。

19.權利要求18的載體，其中所述MVA選自保藏在歐洲動物細胞培 養物保藏中心(ECACC)的保藏號為V00120707的MVA-575，和保藏在 ECACC的保藏號為V00083008的MVA-BN。

20.制備權利要求1-8之一的蛋白的方法，包含以下步驟：

-使用權利要求9-14之一的核酸或權利要求15的載體轉染宿主細胞， 或

-使用權利要求16-19之一的病毒載體感染宿主細胞，

-在轉染后的宿主細胞或感染后的宿主細胞中表達融合蛋白，和

-回收該融合蛋白。