[發明專利]一種骨肽注射劑的制備方法

有效

• 申請號: 200710099629.6
• 申請日: 2007-05-25
• 公開（公告）號: CN101062403A
• 公開（公告）日: 2007-10-31
• 發明（設計）人: 方同華
• 申請（專利權）人: 黑龍江省珍寶島制藥有限公司
• 主分類號: A61K38/02
• 分類號: A61K38/02;A61K35/32;A61K9/12;A61K47/10;A61K47/26;A61K47/36;A61P19/08;A61P19/10
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司
• 代理人: 張慶敏

技術領域

本發明涉及一種骨肽注射劑的制備方法，屬于中藥制劑領域。

背景技術

骨肽為四肢骨中提取出的小分子多肽類物質，具有調節骨代謝，刺激成骨細胞增殖，促進新骨形成，以及調節鈣、磷代謝，增加骨鈣沉積，防治骨質疏松作用。用于促進骨折愈合。

目前，已公開了一些有關骨肽的提取工藝，比如，專利文獻200410013508.1，發明名稱注射用骨肽及其制備工藝，骨提取物系從哺乳動物的骨中提取的多肽類物質，所述的多肽類物質的分子量為3000-10000，所述的多肽與所述的賦形劑的含量比為1-100∶0.01，pH值為3.5-9.0，茚三酮反應為陽性。本產品用于治療增生性骨關節疾病及風濕、類風濕關節炎等，并能促進骨折愈合。

專利文獻200510076912.8，發明名稱骨肽注射液及其制備方法，其制備方法如下：1).將哺乳動物骨用鹽水熱壓煮提一次或多次，離心過濾，合并煮提液，在低溫下放置1～40小時，將提取液溫熱后離心過濾，收集濾液備用；2).將濾液真空濃縮后加入乙醇，靜置沉淀，吸出上層醇液，定容回收乙醇，得水提液；3).將水提液加等體積蒸餾水，依次通過弱酸性陽離子樹脂柱、弱堿性陰離子樹脂柱、珠狀殼聚糖柱和殼聚糖改性活性炭柱，去雜純化，得純凈稀藥液；4).將純凈稀藥液濃縮后，加壓過微孔濾膜，將濾液灌裝、熔封、熱壓滅菌，或將所得藥液通過冷凍干燥，得到凍干粉針劑。

專利文獻200610150890.X，發明名稱注射用骨肽凍干劑及其制備方法，其包括：(1)、取健康新鮮冷凍的哺乳動物的四肢骨稱重，用純化水清洗三遍后，置液壓機上壓碎。將壓碎的四肢骨，置夾層鍋中，按原料重量1∶1～5加入5％NaOH溶液，加熱30～55℃水解12～48小時后取上清液；(2)、上清液置夾層鍋中用HCl調pH值3.0～6.0，加熱至70～100℃15～40min，冷卻降溫至30～55℃，靜置12～48小時后用濾布過濾。

專利文獻200510051475.4，發明名稱一種骨肽提取物、其制備方法及其用途，其將哺乳動物四肢骨經熱壓提取，冷藏去脂肪、調節pH值沉淀、加熱、離心過濾、超濾等步驟制得四肢骨提取物。

目前多數工藝僅采用酸、堿分別沉淀酸性蛋白和堿性蛋白的工藝，其對pH值的精密度要求非常高，否則加入的酸、堿的量或多或少都會導致酸性或堿性蛋白除不凈甚至會引起其它雜質，影響產品質量。

發明內容

本發明的目的是提供一種骨肽注射劑的制備方法，該工藝能更有效地去除大分子蛋白質等雜質，保證產品的高純度。

為了實現本發明目的，本發明的骨肽注射劑的制備方法，包括如下步驟：

1)將豬或牛四肢骨，洗凈，打碎，加入1～4倍重量的純化水，105～120℃高壓提取至少2次，每次1～3小時，合并提取液，過濾，冷藏，除去上層油脂，調pH值1.0～4.0，煮沸，冷藏；

2)過濾取上清液，減壓濃縮至2.5～2.8g(四肢骨)/ml，加入乙醇使含醇體積量達到60～80％，靜置，過濾回收乙醇至無醇味；用注射用水稀配至1～2g/ml，調pH值6.0～8.0；過濾，滅菌；冷凍，緩化后置陰涼避光處或室溫放置；過濾，調pH值6.8～7.2；脫色，調pH值6.8～7.2，滅菌，冷凍至結冰，取出緩化；

3)用注射用水將緩化后的藥液稀釋至每1ml含多肽5.0～15.0mg，粗濾，調pH6.8～7.5，精濾，得骨肽注射液。

其中，優選的為，本發明的制備方法包括如下步驟：

1)將豬、牛四肢骨，洗凈、打碎成5～10cm的小塊，加入2～3倍重量的純化水，110～120℃、0.08～0.1Mpa壓力下提取2次，分別為2～3小時和1～2小時，合并提取液，過濾，于0～5℃冷藏8～36小時，除去上層油脂，調pH值2.0～3.0，煮沸30～60分鐘，冷藏8～24小時；

2)濾取上清液，在70～75℃減壓濃縮至2.5～2.8g(四肢骨)/ml，待溫度降至30℃以下加入乙醇使含醇體積量達到70～80％，靜置8～24小時后過濾至澄清，回收乙醇至無醇味；用注射用水稀配至1g/ml，調pH值6.7～7.3；濾紙過濾，0.22μm濾膜過濾，6000～10000分子量超濾器超濾，115℃滅菌40分鐘；冷凍至結冰，緩化后置陰涼避光處或室溫放置5～20天；再經0.2μm濾膜過濾，用6000～10000分子量超濾器超濾，調pH值6.8～7.2；加入0.2％(g/ml)活性炭，加熱煮沸15～30分鐘，冷卻至40～60℃，0.2μm濾膜過濾，調pH值6.8～7.2，115℃滅菌40分鐘，冷凍至結冰，取出緩化；