[發明專利]高純度甘露聚糖肽的制備方法

有效

• 申請號: 200710093102.2
• 申請日: 2007-12-04
• 公開（公告）號: CN101186941A
• 公開（公告）日: 2008-05-28
• 發明（設計）人: 馬宏偉;李麗;陳爽;曾康芬;江泉;王君山;艾琳;郭才旺
• 申請（專利權）人: 成都川抗萬樂藥業有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12R1/46
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司
• 代理人: 趙榮之

1.一種高純度甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，該制備方法包括如下步驟：

(1)制備發酵產物：α-溶血鏈球菌H₁S-33號菌的深層發酵液，經滅活、濃縮、乙醇沉淀得到含有甘露聚糖肽的發酵產物；

(2)提取及粗品的制備：發酵產物加3～10倍量(W/V)的純化水，在攪拌下進行提取，然后用三氯乙酸調節pH1.5～3.5，靜置、除去沉淀物，清液在攪拌下加濃度90％以上乙醇至40％～80％乙醇濃度，靜置，分離沉淀；沉淀物加純化水按步驟(2)反復溶解、沉淀，干燥得甘露聚糖肽粗品；

(3)大分子甘露聚糖肽的分離：用截留10～30萬分子量的濾膜濾除甘露聚糖肽粗品中的大分子甘露聚糖肽，濾液用截留1～5萬分子量的濾膜進行濃縮處理，得甘露聚糖肽水溶液；

(4)大分子甘露聚糖肽的水解：將大分子甘露聚糖肽用溶菌酶、淀粉酶和纖維素酶中任意一種或者用鹽酸、磷酸、乙酸和氫氟酸中任意一種進行水解。

2.根據權利要求1所述一種高純度甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中酶水解的步驟如下：大分子甘露聚糖肽用5～20倍量(W/V)的純化水溶解，調整pH6.0～8.0，按500～100000U/g的量加入所述溶菌酶、淀粉酶和纖維素酶中任意一種，20～60℃保溫4～20小時，加熱至沸，冷卻至室溫，調整pH2.0～3.0，濾過，得甘露聚糖肽水溶液。

3.根據權利要求1所述一種高純度甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中酸水解的步驟如下：大分子甘露聚糖肽用5～20倍量(W/V)濃度0.5～5％鹽酸、磷酸、乙酸和氫氟酸中任意一種溶液溶解，加熱60～105℃并保溫0.5～8小時，冷卻，調整pH值中性，得甘露聚糖肽水溶液。

4.根據權利要求1至3任意所述一種高純度甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，將步驟(3)和步驟(4)所得甘露聚糖肽水溶液混合，過濾至清，用濃度50～80％乙醇沉淀，靜置、分離沉淀物，干燥。

5.根據權利要求1至3任意所述一種高純度甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，將步驟(3)和步驟(4)所得甘露聚糖肽水溶液混合，用5～20倍量(W/V)的蒸餾水溶解，按0.1～5％(重量)的比例加入活性炭，70～100℃保溫10～60分鐘，冷卻、濾過，清液用濃度50～80％乙醇沉淀，靜置、分離沉淀物，干燥。