[發明專利]一種具有腫瘤靶向性的多肽及其制備方法有效
| 申請號： | 200710066323.0 | 申請日： | 2007-10-29 |
| 公開（公告）號： | CN101143895A | 公開（公告）日： | 2008-03-19 |
| 發明（設計）人： | 董堅;陳明清;劉流;劉為青;張克健 | 申請（專利權）人： | 昆明醫學院第一附屬醫院 |
| 主分類號： | C07K7/06 | 分類號： | C07K7/06;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 昆明正原專利代理有限責任公司 | 代理人： | 金耀生 |
| 地址： | 650000*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 具有 腫瘤 靶向 多肽 及其 制備 方法 | ||
1.一種具有腫瘤靶向性的多肽，其特征在于它的氨基酸序列結構為：CASPSGALRSC；或CFPVPGHDLVC；或CFSVPGHDIVC；或CTPMSLSLSEC；或CYTYPLGWHIC。
2.權利要求1所述的具有腫瘤靶向性的多肽的制備方法，其特征在于按以下步驟進行：
1)應用表達108不同序列蛋白多肽的pC89噬菌體肽庫與人乳腺癌細胞株MDA-MB-231反復共培養多次；篩選能夠穿過細胞膜進入細胞漿和/或細胞核中的表達特異性多肽的噬菌體，體外擴增噬菌體并進行DNA測序，并推導出這些噬菌體上插入的外源氨基酸序列；
2)將上述篩選出的特異性多肽噬菌體與其它人腫瘤細胞及正常細胞進行體外共培養，檢測多肽噬菌體的細胞腫瘤特異性；
3)根據上述多肽序列和細胞特異性檢測結果，人工合成具有腫瘤靶向性的多肽。
3.權利要求1所述的具有腫瘤靶向性的多肽的檢測方法，其特征在于按以下步驟進行：
1)上述合成多肽與不同人腫瘤細胞和正常細胞分別共培養，并檢測該多肽序列在無噬菌體外殼蛋白支持下是否仍具有穿細胞膜的功能；
2)構建特異性多肽聯合表達載體：即pEGFP-多肽、pGEX-2T-多肽及pGEFP-多肽-毒肽，探測該特異性多肽攜帶不同分子量目的蛋白入細胞的可應用性；
3)用同位素標記多肽方法進行動物體內組織特導性親和性實驗，探測其體內腫瘤特異性導向表達的特性。
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