[發(fā)明專利]從桑葉中連續(xù)提取生物堿、黃酮和多糖活性成分的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710060127.2
• 申請(qǐng)日: 2007-12-24
• 公開（公告）號(hào): CN101209284A
• 公開（公告）日: 2008-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李淑芬;賈冬冬;楊鴻玲;林江博;田松江
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K36/605
• 分類號(hào): A61K36/605;A61P3/10;C07D311/30;C07G5/00;C07H1/08;C08B37/00;A61K127/00
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司
• 代理人: 趙敬

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種從桑葉中連續(xù)提取生物堿、黃酮和多糖活性成分的方法，屬于從天然產(chǎn)物中提取生物活性成分的技術(shù)。

背景技術(shù)

桑葉異名鐵扇子，為桑科植物桑(Morus?alba.L)的葉，味苦，甘、寒，分布于全國大部分地區(qū)。現(xiàn)代藥理研究證明桑葉可抑制血糖升高，可預(yù)防和治療糖尿病。此外，桑葉還具有祛風(fēng)清熱、涼血明目的功效，藥性平和且無毒副作用，已經(jīng)被國家衛(wèi)生部正式歸入“既是食品又是藥品”之列。

桑葉中含有多種活性成分，包括生物堿、多糖、黃酮、多酚、氨基酸以及多種微量元素，其中最主要的活性成分為生物堿、多糖及黃酮。Asano?N從桑葉中分離鑒定出11種生物堿，其中1-脫氧野尻霉素(DNJ)在桑葉中的含量達(dá)0.1％，遠(yuǎn)高于其他植物，是α-葡萄糖苷酶最有效的抑制劑之一，具有很強(qiáng)的降血糖作用。桑葉總多糖也是桑葉中的主要活性成分，對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠有顯著的降血糖作用。桑葉中總黃酮含量約占桑葉干重的1.0％～3.0％，主要含有蘆丁、異槲皮苷，槲皮素-3-三葡萄糖苷及紫云英苷等，具有抗氧化、抑制血清脂質(zhì)增加以及抑制動(dòng)脈粥樣硬化形成等作用。有研究表明，桑葉黃酮也具有降血糖作用，且將黃酮與DNJ結(jié)合，比單獨(dú)的DNJ更能有效地抑制血糖的上升。且因此提取分離和純化桑葉中的生物堿、多糖以及黃酮類活性有效部位，制成中成藥或功能保健食品均具有廣闊的前景。

目前關(guān)于桑葉中活性有效部位的分離方面已有一些相關(guān)專利，如國內(nèi)專利號(hào)03101988.9“一種含有桑葉總堿浸膏的制劑及其制備方法”，公開了一種桑葉中的生物堿的制備方法；專利號(hào)200510012388.8“一種桑葉黃酮提取方法”，公開了一種分離桑葉中的黃酮的方法；專利號(hào)01129976.2“一種桑葉多糖產(chǎn)品及其用途”，公開了一種多糖的提取工藝；專利號(hào)200610038713.2“桑葉降血糖有效組分組合物及制備方法”公開了一種分離桑葉中的生物堿和多糖的方法。但是這些專利僅能分離出一種或兩種有效成分，其它有效成分則在純化過程中不得不被作為雜質(zhì)除去，不僅造成了很大的資源浪費(fèi)，產(chǎn)品成本也較高。而且現(xiàn)有的專利均以水為溶劑提取桑葉中的生物堿，而我們的研究實(shí)驗(yàn)表明，水對(duì)生物堿的提取率低于一定濃度溶劑的提取率，而且水提液中成分復(fù)雜，給后續(xù)的分離帶來了困難。另外，目前對(duì)提取的桑葉多糖一般概念籠統(tǒng)，對(duì)其結(jié)構(gòu)和類別的分析還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種從桑葉中連續(xù)提取生物堿、黃酮和多糖活性成分的方法，該方法過程簡單，提取物中生物堿、黃酮和多糖含量高。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案加以實(shí)現(xiàn)的，一種從桑葉中連續(xù)提取生物堿、黃酮和多糖活性成分的方法，其特征在于包括以下過程：

1)按干燥桑葉重量與溶液的體積比為1∶10～15，將粉碎后的干燥桑葉浸泡于體積濃度為20％～90％的乙醇溶液，或浸泡于體積濃度為10％～90％的丙酮溶液，在95℃條件下回流提取3次，每次提取30min，將提取液混合并減壓過濾，得到濾液和濾渣。

2)將步驟1)所得濾液經(jīng)減壓蒸發(fā)除去乙醇，然后按干燥桑葉重量與去離子水的體積比為1∶10～15加入去離子水，靜置2h，離心分離。上清液通過大孔樹脂X-5、D101、D4020、或H103，在20～30℃吸附，首先用離子水洗脫大孔樹脂，然后用乙醇或丙酮溶液洗脫大孔樹脂，收集洗脫液，洗脫液經(jīng)減壓蒸發(fā)去除乙醇或者丙酮，得到質(zhì)量含量為30％～50％的黃酮類化合物，黃酮的主要成分是蘆丁和異槲皮苷。

3)流經(jīng)過大孔樹脂后的溶液，通過型號(hào)為001×7、001×4或001×7×7的陽離子交換樹脂在20～30℃吸附5～10h，先用去離子水沖洗樹脂，再以氨水洗脫樹脂得到洗脫液，洗脫液濃縮至無氨水殘留，再通過型號(hào)為201×7、D201或201×4的陰離子交換樹脂吸附，用去離子水洗脫陰離子交換樹脂得洗脫液，洗脫液經(jīng)減壓蒸發(fā)，得到質(zhì)量含量為40％～60％的生物堿化合物，生物堿的主要成分是1-脫氧野尻霉素(DNJ)。

4)將步驟1)中得到的桑葉濾渣用10～15倍體積的去離子水在60～90℃下煎煮兩次，減壓過濾，收集濾液，濾液經(jīng)過活性炭脫色，脫色后的濾液減壓濃縮至提取液體積的1/5～1/10，之后向濃縮液中加入乙醇，使?jié)饪s液中乙醇體積濃度為10％～60％，靜置10～15h，離心分離得沉淀物。再依次用無水乙醇、丙酮以及乙醚洗滌沉淀物，得到質(zhì)量含量為55％～85％的多糖類化合物，該多糖化合物主要成分為酸性多糖，其分子量500,000～550,000Da。