[發(fā)明專利]一種結核分枝桿菌抗體快速診斷試劑盒及其檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710059908.X
• 申請日: 2007-10-16
• 公開（公告）號: CN101140284A
• 公開（公告）日: 2008-03-12
• 發(fā)明（設計）人: 李洲;楊發(fā)青
• 申請（專利權）人: 天津中新科炬生物制藥有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標代理有限公司
• 代理人: 關永琴

技術領域

本發(fā)明是涉及生物應用技術領域，特別是涉及一種38KD、16KD抗原混合包被的結核分枝桿菌抗體快速診斷試劑盒及其檢測方法。

背景技術

據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全球已有近1/3的人口感染了結核菌，每年新發(fā)病人數(shù)有870萬，死于結核病達200萬例，全球目前有結核病2000萬例。我國結核病人數(shù)居全球第二位，據(jù)衛(wèi)生部2004年估計我國的結核病人為450萬。據(jù)中國疾病預防和控制中心的數(shù)據(jù)顯示，2005年2006年結核的新發(fā)病例數(shù)分別為125萬113萬。我國75％的肺結核病人年齡在15-54歲之間，給社會、家庭造成嚴重的經(jīng)濟負擔；80％的肺結核病人在農村。每年約有13萬人死于結核病，大大超過其他傳染病死亡人數(shù)的總和。疫情在中西部地區(qū)最高。

目前結核病的主要診斷方法有：

一、痰結核菌檢查：痰涂片檢查或痰結核菌培養(yǎng)。是結核病診斷的確診方法之一，檢查簡便易行，準確性較高，但這種方法診斷的陽性率很低，靈敏度在40％以下，若培養(yǎng)則需6-8周時間，診斷時間過長。

二、結核病的影像學診斷：如胸部X射線和CT等。X射線可以早期發(fā)現(xiàn)結核病，確定病灶的部位、性質、范圍，了解發(fā)病情況及用于治療效果的判斷，胸部CT可以發(fā)現(xiàn)較小的或隱蔽部位的病變，可以彌補一般X線檢查的不足。X線檢查對肺結核病的初篩、診斷等起重要輔助作用，但存在需要大型設備，費用較高，胸片存在20％左右的低讀率和讀過率。

三、分子生物學技術診斷：主要指結核桿菌聚合酶鏈反應(PCR)方法，該方法的靈敏度很高，在98％以上。但存在較高的假陽性，特異性差，并且診斷費用較高。

四、免疫學診斷：免疫學診斷有結核菌素純蛋白衍化物(PPD)試驗和抗體診斷等方法。PPD試驗較為傳統(tǒng)的診斷方法之一，在臨床上經(jīng)常使用。該試驗陽性是感染過結核菌的證據(jù)之一，不能很好的區(qū)分現(xiàn)癥感染和既往感染。抗體診斷方法：檢測血清中抗TB免疫球蛋白(IgG)抗體，該方法的靈敏度為60％-80％，特異性為90％。是結核臨床診斷上常用的方法之一，抗體診斷試劑主要為ELISA試劑和膠體金快速診斷試劑。

結核分枝桿菌是胞內感染菌，其免疫主要是以T細胞為主的細胞免疫。體液免疫的強度似乎不足，產生的抗體難以殺滅細胞內的菌體，對血清學診斷具有價值。然而能誘導機體產生抗體的結核抗原成份復雜。以PPD作為抗原的ELISA方法檢測抗體靈敏度在60％以上，特異性為90％左右。隨著相關研究的深入，研究較為深入的結核抗原有：脂阿拉伯甘露聚糖抗原、Ag85復合物、38KD蛋白、A60抗原、16KD蛋白、MPT64、ESAT6、CFP10、MTB48，這些抗原各有其優(yōu)缺點，任何一種抗原都不能含蓋所有的結核病感染。選擇好的抗原是制備好的結核病血清學診斷試劑的關鍵之一。

到目前為止，單一的TB診斷方法的靈敏度和特異性都有待于進一步提高。TB的診斷往往需要多種方法聯(lián)合檢測，TB抗體的檢測由于簡便、靈敏、快速、價廉和相對較高的靈敏度和特異性在國內外臨床均有運用，是結核病診斷的常用輔助診斷方法。但由于TB抗體診斷試劑的研制存在一定的技術性問題，到目前為止真正商品化的產品有限，在中國食品和藥品監(jiān)督管理局獲得注冊文號只有成都永安制藥有限公司的結核分枝桿菌抗體檢測試劑盒(ELISA)，上海奧普生物醫(yī)藥有限公司物結核分支桿菌抗體膠體金試劑盒(免疫滲濾法)，北京現(xiàn)代高達生物技術有限公司和新加坡GenelabsDiagnostics的TB抗體診斷試劑盒(膠體金法)。相對于我國數(shù)百萬的結核病患者，本類產品具有較大的市場空間。本公司從2005年起研制TB抗體診斷試劑盒(膠體金法)，經(jīng)不懈努力，經(jīng)對比試驗和臨床試給，研制出了符合要求的產品。和已注冊的同類試劑性能相似，由于不同廠家采用的原料和工藝研究有所不同，產品性能相似的基礎上又存在差別，在診斷上可能存在優(yōu)勢互補。