[發(fā)明專利]從大棗中提取環(huán)磷酸腺苷的工藝方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710058382.3
• 申請日: 2007-07-24
• 公開（公告）號: CN101108871A
• 公開（公告）日: 2008-01-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 歐來良;王為超;張華;孔德領(lǐng)
• 申請（專利權(quán)）人: 天津歐瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C07H19/213
• 分類號: C07H19/213;A61K36/725
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司
• 代理人: 趙敬

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉大孔吸附樹脂在中藥成分分離、純化中的應(yīng)用，特別是一種從大棗中提取環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的工藝方法。

背景技術(shù)

我國是世界上棗資源最豐富的國家，也是世界上惟一出口紅棗的國家。大棗是鼠李科(Rhamnaceae)棗屬植物棗樹的成熟果實，大棗又稱紅棗，原產(chǎn)于中國。中國棗資源在世界上獨一無二的生產(chǎn)栽培優(yōu)勢，具有巨大的發(fā)展空間和經(jīng)濟效益。環(huán)核苷酸是棗果中特色最為突出的重要生物活性物質(zhì)，為蛋白激酶致活劑，是有機體中廣泛存在的一種重要的生理活性物質(zhì)，細胞內(nèi)傳遞激素和遞質(zhì)作用的中介因子，起著放大激素的作用信號和控制遺傳信息的作用，作為第二信使(Second?messager)，參與多種生理生化過程的調(diào)節(jié)。臨床醫(yī)學(xué)表明，cAMP不僅對冠心病、心肌梗塞等心血管病有預(yù)防和治療作用，而且還具有調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)合成，促進激素分泌的作用。cAMP在調(diào)節(jié)細胞增值與分化這一對既相聯(lián)系又相矛盾的過程中，起著重要的作用，對離體細胞有抑制細胞分裂、促進其分化的作用。因此，凡能使細胞內(nèi)cAMP含量升高的因素均能降低細胞的生長速度，抑制細胞的增殖，從而促進細胞的分化。據(jù)報導(dǎo)，大棗中cAMP的含量在高等植物中是最高的，是梨含量10倍以上，達到500nmol/g，是一般動植物材料環(huán)核苷酸含量的數(shù)千至數(shù)萬倍，具有廣闊的開發(fā)利用價值。

目前有關(guān)大棗中提取cAMP的研究報道較少，大多數(shù)研究集中于大棗中cAMP的分離分析方面。文獻報道K-Hanabusa等將棗粉置于5℃水，攪拌1h，均化，離心，沉淀，使其溶于水，離心分離，取上清液合并后連續(xù)上兩次DowexIx4型甲酸鹽柱，0.05mol/l甲酸洗脫，洗脫液上氧化鋁柱后，再上一次DowexIx4型柱，所得組分凍干，最后得到純度為34％的cAMP，TLC純化后得到純度97％cAMP產(chǎn)品。中國專利CN200410018617公開了一種從大棗中分離cAMP的方法，該專利經(jīng)過4次柱層析，并結(jié)合溶劑萃取方法的配合，得到了90％以上的cAMP產(chǎn)品。由以上可以看出，目前有關(guān)大棗中分離環(huán)磷酸腺苷的方法，工藝非常繁瑣，很難產(chǎn)業(yè)化。同時工藝步驟地增加也勢必造成目標(biāo)成分的損失和生產(chǎn)成本的增加，因此發(fā)明一種簡單的適合產(chǎn)業(yè)化的大棗中提取環(huán)磷酸腺苷的方法將具有廣闊的經(jīng)濟和社會價值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種新的從大棗中提取環(huán)磷酸腺苷的工藝方法，它是利用大孔樹脂吸附法從大棗中提取分離cAMP，以充分利用我國豐富的以充分利用我國豐富的大棗資源，深層挖掘大棗的藥用價值。本發(fā)明的優(yōu)點為工藝簡單，產(chǎn)品質(zhì)量好，提取率高，原料豐富，成本低，無三廢，不污染環(huán)境，經(jīng)濟效益大。

本發(fā)明的工藝流程為：大棗粉碎后用水或乙醇的水溶液作溶劑進行滲漉或加熱提取。提取液經(jīng)冷卻后過濾，得透明粗提液。在交換柱內(nèi)裝大孔吸附樹脂OU-1樹脂，大棗提取液上柱后，先用乙醇水溶液預(yù)洗，以去除大量雜質(zhì)；再用鹽酸水溶液淋洗，得cAMP解吸液。cAMP解吸液用NaOH調(diào)節(jié)pH后，通入另一個裝有大孔吸附樹脂ME-2樹脂的交換柱，水洗后，再用乙醇水溶液解吸，解吸液濃縮、干燥后即得產(chǎn)品。

本發(fā)明從大棗中提取環(huán)磷酸腺苷的工藝方法包括下述步驟：

1)將大棗原料粉碎，用水或乙醇的水溶液作溶劑進行滲漉或乙醇溶液加熱提取，冷卻至室溫后過濾，得澄清透明提液。

2)將澄清提取液通入裝有大孔吸附樹脂(OU-1大孔吸附樹脂)的樹脂柱中吸附，用水洗滌和鹽酸水溶液解吸，得解吸液1；吸附、洗滌或解吸的流速為0.5-2.5個床體積/小時。

3)解吸液1經(jīng)氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH后通入另一個裝有大孔吸附樹脂(ME-2大孔吸附樹脂，天津歐瑞生物科技有限公司生產(chǎn))的交換柱中吸附，用水洗滌和乙醇水溶液解吸，得解吸液2；吸附、洗滌或解吸的流速為0.5-2.5個床體積/小時。

4)解吸液2經(jīng)濃縮、干燥得cAMP大棗提取物產(chǎn)品。

步驟1)所述的溶劑乙醇水溶液的濃度為5％-80％。

步驟1)所述的提取溫度是10-80℃。

步驟2)所述的大棗原料重量與樹脂的體積是1∶1～4(克∶毫升)。

步驟2)所述的樹脂柱徑和柱高比為1∶5～30。

步驟2)所述的鹽酸水水溶液解吸液為0.1％-10％的鹽酸水溶液。步驟3)解吸液經(jīng)調(diào)解pH后，pH為1-6。所述的兩種樹脂(OU-1、ME-2)的質(zhì)量比為1∶1-5。所述的OU-1樹脂洗滌液為水或5-85％的乙醇；步驟3)所述的ME-2樹脂洗滌液為水或5％-20％的乙醇水溶液。

步驟3)所述的乙醇解吸液為5％-90％的乙醇水溶液。