[發明專利]栽培小麥Brock中一個受白粉菌誘導應答的基因cDNA序列及其獲得方法

無效

• 申請號: 200710058140.4
• 申請日: 2007-07-16
• 公開（公告）號: CN101126091A
• 公開（公告）日: 2008-02-20
• 發明（設計）人: 王振英;李剛;彭永康
• 申請（專利權）人: 天津師范大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司
• 代理人: 朱紅星

1.栽培小麥Brock中一個受白粉菌誘導應答的基因cDNA序列，其特征在于它與小麥TCTP基因有98％的同源性，cDNA全長766bp；有一個長36bp的5’UTR和長223bp的3’UTR以及長507bp的開放閱讀框；編碼一個168aa的多肽鏈，cDNA序列為：

TCCTTTTTCGGGGGAGAAATCTCAAGAGGCGGCACCTCGCACTGTATGCTAAAATCTATGCTGTCTTCAGTATTTTTGCTCTTATCTATGGTTGTCAGTCGACTCTCCAATGTTGGTGTCAGTAACTGTCAGATGTTGAGTGTCTTGAAAACTTTCTGATAATTGTGGGATTTGCTTTGTAATGGTAATCGTGAAATTGGTGTGGTTGTGTTTTGGTTGAATCAAGAGATTCTGCCCTGTTAAAAAAAAAAAAAAAAAA

其中上述序列的陰影部分為編碼序列，ATG示起始密碼子，TAA示終止密碼子。

2.如權利要求1所述的栽培小麥Brock中一個受白粉菌誘導應答的基因cDNA序列，其特征在于，該基因的編碼區長507bp，編碼168aa多肽鏈的氨基酸序列為：MLVYQDKLSGDELLSDSFPYRELENGVLWEVDGHWVVQGAVDVDIGANPSAEG?????????????????????????????????????????????TCTP1GGDDEGVDDQAVKVVDIVDTFRLQEQPAFDKKQFISHMKRYIKNLSAKLEGDDLDAFKKNVESATKYLLSKLKDLQFFVGESMHDDGGVVFAYYKEGAADPTFLYFAHGLKEVKC??????????????????????TCTP2

其中TCTP1、TCTP2為多肽鏈氨基酸序列的兩個結構特征區。

3.如權利要求1或2所述的栽培小麥Brock中一個受白粉菌誘導應答的基因cDNA序列，其特征在于，它是用同源克隆技術采用下述方法得到的：以抗白粉病普通小麥Brock為材料，提取白粉菌脅迫5天的總體RNA，根據小麥NBS類抗病基因保守序列設計的簡并引物，經RT-PCR擴增，獲得比預期大、與TCTP基因cDNA有97％同源性的653bp?cDNA片段，通過RACE技術，獲得全長為766bp的完整TCTP基因，與已發表的小麥TCTP基因有98％的同源性，該基因包括一個507bp的開放閱讀框，36bp的5’非翻譯區，223bp的3’非翻譯區；編碼一個168aa的多肽鏈，與已發表的小麥TCTP基因編碼的氨基酸序列有99％的同源性；ScanProsite分析表明，該多肽鏈具有TCTP1和TCTP2兩個特征結構區和7個可能的功能位點；表達半定量PCR分析表明，Brock中的TCTP基因受白粉菌誘導，并隨染菌時間增長，表達量增加。