[發明專利]一種植物根表生防細菌的快速、高效篩選方法

無效

• 申請號: 200710056059.2
• 申請日: 2007-09-11
• 公開（公告）號: CN101148648A
• 公開（公告）日: 2008-03-26
• 發明（設計）人: 許艷麗;李春杰;于澤波
• 申請（專利權）人: 中國科學院東北地理與農業生態研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20
• 代理公司: 長春科宇專利代理有限責任公司
• 代理人: 楊恕平

1.一種植物根表生防細菌的快速、高效篩選方法，其特征在于采用改進的TY培養基，稀釋平板法分離細菌，在另一Ch+TY平板上均勻地涂上病原真菌懸浮液，然后接種菌落形狀、大小和顏色不同的10個細菌菌落進行培養，觀察真菌周圍是否有抑菌帶出現，有抑菌帶出現的即為目標細菌；其方法及具體步驟如下：

a.細菌分離和初篩

用酒精將剪子和鑷子表面消毒后，剪3cm左右的不同植物干根，在無菌室將剪下的不同植物干根置于Ch+TY平板上，然后用接種針挑取病原真菌，在植物根平行的位置劃線，于25℃真菌培養箱中培養3天左右觀察抑菌情況，發現植物根周圍有大量細菌，細菌周圍出現抑菌帶(不長真菌)或菌絲長得較短、產生較少孢子或沒有孢子產生，即為目標細菌；

b.純化

此時細菌為混合菌，需小心用接菌環挑出細菌，劃線純化，于28℃細菌培養箱中培養，一天后即可觀察，如果發現仍有形狀、大小和顏色不同的細菌菌落，則需分別挑取進一步純化，直至每皿呈現形狀、大小和顏色均相同菌落；

c.復篩方法

將已純化的細菌與病原真菌于Ch+TY平板上劃平行線對峙培養，或于Ch+TY平板中心點接入病原真菌，真菌周圍約等距離四點接入細菌，于25℃真菌培養箱中培養，2-3天可測定抑菌帶寬，計算抑菌率；

d.保存

將已純化的細菌接到試管斜面中，蛇形劃線28℃培養一天后，儲存4℃冰箱中，或將生防菌接入直徑為4cm的Ch+TY培養皿中心，28℃培養一天后，儲存4℃冰箱中。