[發明專利]魚類精子超低溫冷凍保存簡易方法

無效

• 申請號: 200710051591.5
• 申請日: 2007-02-15
• 公開（公告）號: CN101088511A
• 公開（公告）日: 2007-12-19
• 發明（設計）人: 柳凌;張潔明;危起偉;郭峰;朱永久
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院長江水產研究所
• 主分類號: A61K35/52
• 分類號: A61K35/52;A01N1/00;F25D3/10
• 代理公司: 荊州市技經專利事務所
• 代理人: 王春玲

1.魚類精子超低溫冷凍保存簡易方法，其特征是：

(1)鮮精采集10毫升鯉魚精子后，放置于溫度為4℃的冰箱內，每次取5毫升鮮精，加入20毫升稀釋液于30毫升指管瓶中混勻，總體積為25毫升，在溫度為4℃冰箱內平衡30分鐘，其稀釋液為8克NaCl，0.5克KCl，15克葡萄糖，蒸餾水定溶至1000毫升，pH6.0；

(2)平衡完成后，加入2.16毫升‘DMSO’，使其抗凍劑的濃度達到8％，混勻后，立即用0.5毫升麥細管分裝，50支麥細管即可全部分裝完成，分裝時間需30-60秒；

(3)將分裝好的麥細管橫放在泡沫箱液氮面上的泡沫板上，泡沫板中空寬10厘米，長20厘米，厚2.5厘米時，可放50支以上的麥管；

(4)蓋上泡沫箱蓋，保持20分鐘，同時重復(1)～(3)的過程，20分鐘后，提起泡沫板一端，使麥管滾入下面液氮中，再放第二批分裝好的麥細管，如此重復，直到全部精子冷凍完；

(5)5分鐘后，將泡沫箱內液氮中的麥細管全部轉入液氮罐中，在溫度為-196℃中長期保存。

2.魚類精子超低溫冷凍保存簡易方法，其特征是：

(1)鮮精采集20毫升胭脂魚精子后，放置于4℃的冰箱中，每次取10毫升鮮精，加入30毫升稀釋液于50毫升指管瓶中搖勻，總體積為40毫升，在4℃冰箱內平衡30分鐘，其稀釋液8克NaCl，0.5克KCl，15克葡萄糖，蒸餾水定溶至1000毫升，pH7.0；

(2)平衡完成后，加入3.26毫升‘DMSO’，到8％，混勻后，立即用0.5毫升麥管分裝，約80支麥管即可全部分裝完成，分裝時間需30-60秒；

(3)將分裝好的麥管橫放在泡沫箱液氮面上的泡沫板上，泡沫板中空寬10厘米，長30厘米，厚3厘米時，可放80支以上的麥細管；

(4)蓋上泡沫箱蓋，保持20分鐘，同時重復(1)～(3)的過程，20分鐘后，提起泡沫板一端，使麥細管滾入下面液氮中，再放第二批分裝好的麥細管，如此重復，直到全部精子冷凍完；

(5)5分鐘后，將泡沫箱內液氮中的麥管全部轉入液氮罐中，在溫度為-196℃中長期保存。