[發(fā)明專利]發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q10的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710041442.0 | 申請日: | 2007-05-30 |
| 公開(公告)號: | CN101314782A | 公開(公告)日: | 2008-12-03 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 陳學(xué)軍 | 申請(專利權(quán))人: | 寧波天安生物材料有限公司 |
| 主分類號: | C12P7/26 | 分類號: | C12P7/26;C12R1/05;C12N1/20 |
| 代理公司: | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 | 代理人: | 范征 |
| 地址: | 315800浙江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 發(fā)酵 生產(chǎn) 輔酶 q10 方法 | ||
1.一種生產(chǎn)輔酶Q10的方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:
(a)對真養(yǎng)產(chǎn)堿桿菌(Alcaligenes?eutruphus)進(jìn)行高密度發(fā)酵至菌體干重為90 克/升以上,其中所述真養(yǎng)產(chǎn)堿桿菌菌株選自真養(yǎng)產(chǎn)堿桿菌H16.65-7或真養(yǎng)產(chǎn)堿 桿菌NCIB11599;
(b)從發(fā)酵液中分離所述菌體;和
(c)從所述分離的菌體中提取出輔酶Q10。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(a)中的高密度培養(yǎng)是在具 有以下成分的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng):葡萄糖15-25克/升,硫酸銨1.6-2.0克/升,磷 酸氫二鉀1.4-1.7克/升,磷酸氫二鈉8-10克/升,硫酸鎂1.5-2.5克/升,酵母膏2-4 克/升,蛋白胨1-3克/升,pH6.8-7.0;在發(fā)酵過程中,糖濃度控制在2-2.5%,溫 度控制為30℃,風(fēng)量為0.3-1VVM,pH為6.8-7.0,發(fā)酵時間26-40小時。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(b)中的分離步驟是, 先從發(fā)酵液中分離出固體,加入水并調(diào)節(jié)pH至堿性,加熱至80-100℃,然后分 離得到所述菌體。
4.如權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述pH調(diào)節(jié)至pH10-12,所述 加熱在80-100℃下維持為30-60分鐘。
5.如權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述步驟(b)還包括,在過濾得 到菌體之后,用選自噴霧干燥、滾筒干燥、氣流干燥或烘房的方法對所述菌體進(jìn) 行干燥,并維持菌體溫度在80℃以下。
6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(c)采用有機(jī)溶劑回流 萃取法和/或?qū)游龇椒ā?
7.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述有機(jī)溶劑選自是氯仿、丙 酮、四氯化碳、乙醚或石油醚,萃取時間為5-60分鐘;所述層析采用硅膠柱層析。
8.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,該方法還包括將提取得到的輔 酶Q10溶解在無水酒精中,然后在0℃-6℃下冷藏。
9.真養(yǎng)產(chǎn)堿桿菌的用途,用于高密度發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q10,其中所述真養(yǎng)產(chǎn) 堿桿菌菌株選自真養(yǎng)產(chǎn)堿桿菌H16.65-7或真養(yǎng)產(chǎn)堿桿菌NCIB11599。
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