[發明專利]3－氨基－2－噁唑烷酮衍生物半抗原及其制備方法

無效

• 申請號: 200710032840.6
• 申請日: 2007-12-26
• 公開（公告）號: CN101230048A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發明（設計）人: 沈玉棟;張世偉;孫遠明;肖治理;雷紅濤;王弘
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07D263/26
• 分類號: C07D263/26;G01N33/53
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明屬于免疫學技術領域，具體地說，涉及一種3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物半抗原及其制備技術。

背景技術

呋喃唑酮，又稱痢特靈，屬硝基呋喃類藥物，為廣譜抗生素，對革蘭陽性及陰性菌均有一定抗菌作用。由于呋喃唑酮價格低廉且抗菌效果好，因此被廣泛應用于家禽、家畜、水產類的痢疾、腸炎、球蟲病以及火雞黑頭病的預防和治療中。但有關研究證明，硝基呋喃類藥物及其代謝物具有相當大的毒性，有致畸胎副作用，且能誘發癌癥，因而引起了人們的高度重視。1990年7月歐盟頒布2377/90/EEC條例，將硝基呋喃類藥物及其代謝產物列為A類禁用藥物，規定其在動物源性食品中的殘留檢測限為1.0μg/kg。自1995年起歐盟全面規定禁止使用呋喃類抗菌物質，在動物源性食品中呋喃類殘留物的檢出限為不得檢出。2004年美國FDA公布了禁止在進口動物源性食品中使用的11種藥物名單，其中包括呋喃西林和呋喃唑酮。我國農業部文件農牧發[2002]1號也規定動物源性食品中呋喃唑酮的檢出限為不得檢出。

因為硝基呋喃類藥物原藥分子在體內很快就代謝，而蛋白結合態代謝產物能在組織中存留較長時間，所以在分析此類藥物的殘留時必須分析其代謝后的產物。

傳統的硝基呋喃分析方法利用色譜、質譜等物化手段定性定量。但這些方法繁瑣、儀器化程度高及分析速度慢，不能滿足及時、快速的檢測要求。免疫學檢測方法具有簡便、快速、靈敏、高特異性等優點，越來越被關注。國際權威學術刊物將其列為近年來首位優先發展的新分析技術。

大多數藥物、毒素、環境污染物分子質量小于1000u，屬于僅有反應原性而無免疫原性的半抗原。目前制備小分子半抗原抗體的常規方法為：選擇具有毒理學意義的代謝產物或原形藥物作為待測物，設計合成保留待測物分子結構特征并帶有活性基團的半抗原，通過共價鍵使半抗原與大分子蛋白質載體偶聯，制備人工免疫原，經動物免疫程序制備針對半抗原的特異性抗體。

半抗原設計為抗體制備的關鍵所在，也是免疫化學分析中最為困難的關鍵步驟。合理的半抗原設計將大大提高抗體的質量。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術存在的缺陷，提供一種3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物半抗原，此半抗原偶連載體蛋白后能使機體產生效價高，特異性好的針對3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物的抗體。

本發明的另一個目的是提供上述3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物半抗原的制備方法。

本發明3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物半抗原是3-氨基-2-噁唑烷酮與帶羧基的苯甲醛衍生物氨醛縮合后的產物。

上述帶羧基的苯甲醛衍生物優選間羧基苯甲醛、2-(4-甲?；窖趸?乙酸、式(I)或式(II)；其中n為1～9的自然數。

所得到的3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物半抗原的結構式分別為：

其中n為1～9的自然數。

上述3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物半抗原的制備方法，包括以下步驟：

(1)通過水合肼和環氧乙烷合成乙醇肼；

(2)通過乙醇肼和碳酸二甲酯合成3-氨基-2-噁唑烷酮；

(3)將3-氨基-2-噁唑烷酮與帶羧基的苯甲醛衍生物在室溫條件下于甲醇中進行氨醛縮合反應，即可生成目標半抗原。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：

本發明針對3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物，此半抗原在分子結構，立體化學和電子分布上與3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物對應體相似。半抗原結構中的連接臂不易于誘導產生“臂抗體”，并且使用了一定長度的飽和碳鏈，使機體更易于識別。半抗原分子具有便于與蛋白載體偶聯的活性基團，且活性基團的存在對待測物分子的電子分布沒有影響。此半抗原偶連載體蛋白后能使機體產生效價高，特異性好的針對3-氨基-2-噁唑烷酮衍生物的抗體。

具體實施方式

實施例1?乙醇肼制備方法

量取1000mL80％水合肼(16.48mol)至2000mL三口燒瓶中，于-10℃乙醇浴，攪拌至水合肼冷卻后，緩慢注入100ml液態環氧乙烷(2mol)，反應1h后緩慢升高乙醇浴溫度至40℃，繼續反應1h。將反應液95℃減壓蒸餾，得130ml無色油狀液體。

實施例2?3-氨基-2-噁唑烷酮制備方法