[發明專利]一種用于動物細胞灌流培養的過濾－沉降雙結合灌流系統

有效

• 申請號: 200710028853.6
• 申請日: 2007-06-27
• 公開（公告）號: CN101085978A
• 公開（公告）日: 2007-12-12
• 發明（設計）人: 肖成祖;楊琴;李智;陸進麗;梁倩茹;陳小飛
• 申請（專利權）人: 廣州銘康生物工程有限公司
• 主分類號: C12M1/36
• 分類號: C12M1/36;C12M1/12
• 代理公司: 廣州知友專利商標代理有限公司
• 代理人: 李海波

技術領域

本發明涉及一種用于動物細胞灌流培養的過濾-沉降雙結合灌流系統，屬于細胞工程領域和生物制藥領域。

背景技術

用動物細胞生產基因工程藥物的品種越來越多，特別是工程抗體的出現，產量已成為生產的“瓶頸”。用灌流培養系統替代傳統的批次或批次-補加的生產工藝已越來越引起人們的關注。采用灌流培養系統可大大提高細胞密度和產量，大大減少設備和產房的投資。為了進行有效的灌流培養，其核心是要有一套高效率、低成本、并可長期使用的將細胞截留在反應罐內的灌流系統。至今已有報告的截留裝置有內置式或外置式過濾器、沉降裝置、中空纖維、超聲濾器、離心機等，這些截留裝置中有的截留效率有限、有的造價很高、有的使用時間不長，都還存在某些不足，不能滿足各方需要。

發明內容

本發明的目的是提供一套結構簡單、成本低、截留效率高、可長期使用，適用于動物細胞的微載體或結團灌流培養的過濾-沉降雙結合灌流系統。

本發明的目的通過采取以下技術方案予以實現：

一種用于動物細胞灌流培養的過濾-沉降雙結合灌流系統，包括過濾-沉降二合一灌流柱，蠕動泵，自動控制器，三通管道和管道夾，所述的過濾-沉降二合一灌流柱通過三通管道與蠕動泵連接，蠕動泵由自動控制器控制運轉，管道夾設置在過濾-沉降二合一灌流柱與蠕動泵之間連接的管道上。

本發明所述的過濾-沉降二合一灌流柱包括內柱和外套，內柱套在外套內，其中內柱由20～70μm孔徑的濾網、支架和出液管組成，外套由上蓋、套筒和出液管組成，內柱的出液管和外套的出液管分別置于內柱和外套的上端并與抽液管道相連，過濾-沉降二合一灌流柱置于反應罐內。

本發明所述的蠕動泵是可以長期運轉的、正向和反向旋轉的蠕動泵，包括抽液蠕動泵和加料蠕動泵，抽液蠕動泵連接有抽液罐，加料蠕動泵連接有加料罐。

本發明所述的自動控制器是能定向和定時控制蠕動泵旋轉方向和時間的電子數字自動控制器。

本發明所述的過濾-沉降二合一灌流柱的內柱通過三通管道連接于加料罐，并由管道夾控制開關用于人工控制新鮮培養基沖洗內柱的濾網。

本發明的技術特點是：

(1)當生物反應器內細胞在微載體或結團培養初期，有部分細胞還未進入載體，或還未形成足夠大的結團，灌流柱中的濾網內柱可對單個或細胞小結團起截留作用；

(2)為避免細胞堵塞濾網，控制蠕動泵正反轉方向和時間的電子數字自動控制器可使蠕動泵間隙式地用收獲的上清將附著在濾網上的細胞沖下；

(3)為增強沖下濾網上細胞的效率，利用可轉換至新鮮培養基的三通管道和管道夾，每天1～2次短時間人工地用新鮮培養基沖洗內柱的濾網；

(4)進入細胞的載體或較大的細胞結團，比重較大，灌流柱外套可將其截流在套管的下部，從而減輕了濾網內柱的過濾負荷和堵塞的機率；

(5)當細胞密度很高，載體或細胞結團比重很大時，收獲上清可不經濾網內柱，直接經沉降外套的出液口收液，同樣，當細胞灌流培養時間過長，部分細胞老化時，也可用以更換部分載體和細胞。

綜上所述，本發明具有結構簡單、成本低、截留效率高、可長期使用等特點，可廣泛應用于動物細胞的微載體或結團灌流培養。

附圖說明

圖1為本發明的過濾-沉降二合一灌流柱結構示意圖；

圖2為本發明灌流系統的具體實施流程示意圖。

具體實施方式