[發(fā)明專利]肝臟疾病血清特異蛋白及其應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710028695.4
• 申請(qǐng)日: 2007-06-20
• 公開（公告）號(hào): CN101328214A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭濤;古艷麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院
• 主分類號(hào): C07K14/765
• 分類號(hào): C07K14/765;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司
• 代理人: 劉孟斌

1.一種肝臟疾病標(biāo)志物血清蛋白gp73，其特征在于它具有如序列表sequence?1的核苷酸序列及sequence?2的氨基酸序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述肝臟疾病標(biāo)志物血清蛋白gp73，其特征在于它具有以下特征：

(a)該蛋白主要定位在高爾基體上；

(b)是一個(gè)II型跨膜蛋白，具有5個(gè)糖基化位點(diǎn)，分子量約45KD，糖基化后約為73KD；

(c)該蛋白基因序列保守，從兩棲類到靈長類，都有其同源蛋白，功能相當(dāng)保守；

(d)在正常人肝臟組織表達(dá)量很低，而有肝臟疾患的病人肝臟中卻大量表達(dá)。

3.一種肝臟疾病血清特異蛋白gp73的檢測(cè)方法，其特征在于它包括以下步驟：

(a)構(gòu)建gp73重組質(zhì)粒，原核表達(dá)并純化；

(b)用該蛋白免疫小鼠和兔子，制備抗gp73的特異性單克隆抗體或多克隆抗體；

(c)建立免疫學(xué)檢測(cè)方法；

(d)收集健康人和有肝臟疾病患者的血清樣品，檢測(cè)血清中g(shù)p73的含量。

4.如權(quán)利要求3所述的檢測(cè)方法，其特征在于，在步驟(b)中的gp73特異性單克隆或多克隆抗體，不僅識(shí)別原核表達(dá)的gp73，而且還特異性識(shí)別真核細(xì)胞中的gp73或者是識(shí)別gp73多肽片段。

5.如權(quán)利要求3所述的檢測(cè)方法，其特征在于，用原核表達(dá)純化的gp73作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量血清中的gp73含量，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將正常人的檢測(cè)平均值加上兩倍標(biāo)準(zhǔn)方差定為閾值，將檢測(cè)的病人血清gp73含量與正常人的血清gp73含量進(jìn)行對(duì)比，高于該閾值的將診斷為肝臟異常。

6.一種肝臟疾病血清特異蛋白gp73的檢測(cè)試劑盒，其特征在于它包括：

(a)包被有g(shù)p73特異性單克隆抗體的酶標(biāo)板；

(b)抗gp73的特異性多克隆抗體或者是酶標(biāo)記的抗gp73的多克隆抗體；

(c)酶標(biāo)記羊抗兔IgG的抗體；

(d)gp73的標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

(e)底物顯色液和終止液；

(f)濃縮洗滌液。

7.肝臟疾病血清特異蛋白gp73在制備病毒性肝炎、肝硬化、肝損傷診斷試劑中的應(yīng)用。