[發明專利]化妝品中倍他米松的高效液相色譜檢測方法

無效

• 申請號: 200710027923.6
• 申請日: 2007-05-10
• 公開（公告）號: CN101169396A
• 公開（公告）日: 2008-04-30
• 發明（設計）人: 鄭偉東
• 申請（專利權）人: 廣東省保化檢測中心有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/88;G01N30/60;G01N30/74;G01N30/08
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技術領域

本發明是一項利用高效液相色譜儀檢測化妝品中禁用成分一倍他米松(Betamethasone)的新技術，尤其適用于化妝品中倍他米松的定性及定量分析。

背景技術

倍他米松屬于腎上腺皮質激素類藥物，具有抗菌、消炎的作用。國家衛生部頒布的2002年版《化妝品衛生規范》規定，化妝品中不得添加倍他米松。倍他米松由于其廣譜高效的殺菌作用，被添加到祛痘類產品以達到消炎、祛痘、除螨及抗粉刺的目的。但這種藥物的不良反應較多，有滁鈉作用，對生長的抑制作用較強；還能引起皮質類固醇激素引起的各種不良反應，如肌肉骨骼、胃腸道、皮膚、神經系統、內分泌系統的異常和水電解質紊亂等。鑒于以上這些不良反應，長期使用添加有倍他米松的化妝品或皮膚性接觸此種藥物可嚴重影響人體健康。

目前關于倍他米松檢測的文獻報道大都是針對倍他米松原料和藥品中倍他米松的檢測方法，主要有旋光法、分光光度法、高效液相色譜法等。旋光法影響因素較多，需要標準對照品和樣品的量較多，不適宜微量倍他米松的分析；分光光度法操作繁瑣，樣品處理過程中損失較多，且檢出限較高，重復性較差；高效液相色譜方法是近幾年檢測倍他米松較常用的方法，但也僅僅局限于原料藥和各種藥品制劑中含量的檢測，由于藥品組分較少，基質簡單，干擾因素較少，且樣品預處理簡單目標檢測物損失小，因此藥品中倍他米松的含量容易檢測。而化妝品、飼料、肉類中的倍他米松含量的檢測國家還沒有制定相關的檢測標準和方法，并且到目前為止化妝品中倍他米松的檢測也沒有相關的文獻報道。與藥品不同，化妝品種類繁多有膏、霜、乳、粉、水、啫喱、凝膠等多種劑型，并且基質復雜，各成分的理化性質差別較大，干擾因素較多，尤其是倍他米松作為化妝品禁用成分添加到化妝品中，其含量較低，用上述的旋光法、分光光度法很難準確的檢測出化妝品中微量的倍他米松成分。因此，針對現有倍他米松檢測技術上的不足，我們設計了一種用高效液相色譜方法檢測化妝品中倍他米松的方法，該方法操作簡單，專屬性好，靈敏度高，且適宜化妝品中倍他米松的微量檢測。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測化妝品中倍他米松的分析方法，該項技術利用高效液相色譜儀不僅可以對化妝品中的倍他米松進行準確的定性分析，而且還可以進行微量的定量分析。

本發明針對倍他米松的理化性質用一定濃度的甲醇-鹽酸混合液或乙腈-鹽酸混合液提取化妝品中的倍他米松，然后將提取液過濾，濾除固體雜質，直至濾液澄清，取制備好的樣液上機，用甲醇-水溶液或乙腈-水溶液進行洗脫分離。所用高效液相色譜儀的主要配置包括十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的C18柱或C8柱、二極管陣列檢測器或紫外檢測器。

本發明方法的主要分析步驟如下：

1樣品預處理

稱取一定量的化妝品(乳、膏、霜或水劑)于10ml刻度離心管中，加入6ml左右的提取液(甲醇∶0.01～1.00mol/ml鹽酸＝20～80％∶80～20％或乙腈∶0.01～1.00mol/ml鹽酸＝20～80％∶80～20％)，渦旋混勻使基質充分分散，定容至刻度，再超聲提取15-30min，將提取液轉移至Eppendorf管中冰浴30min使基質析出，12000rpm/min離心5min，如果有必要可以再用0.45μm濾膜過濾。

2色譜條件

(1)色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的反相色譜柱C18或C8柱；

(2)檢測器：二極管陣列檢測器或紫外檢測器；

(3)檢測波長：選用190-380nm波長作為檢測波長；

(4)流動相：采用甲醇∶水＝20～80％∶80～20％或乙腈∶水＝20～80％∶80～20％混合液作為流動相，平衡色譜柱約20min，使基線平穩，該條件下保留時間適合，峰形對稱，分離度好(R＞1.5)。

(5)流速：0.5～1.5ml/min；

(6)柱溫：15～35℃。

3濃度計算方法

用倍他米松標準物質配制成一定梯度濃度的標準溶液，取20μl進樣，按外標法，以峰面積-濃度作線性回歸，得出線性回歸方程，利用該方程和測得的樣品中倍他米松的峰面積計算樣品中倍他米松的含量。

4樣品檢測

(1)按照1中的方法進行樣品預處理，取處理好的樣品20μl進樣；然后再取適當濃度的倍他米松標準溶液20μl進樣。