[發明專利]一種檢測葡萄糖的酶電極的制備方法

有效

• 申請號: 200710025323.6
• 申請日: 2007-07-23
• 公開（公告）號: CN101105471A
• 公開（公告）日: 2008-01-16
• 發明（設計）人: 金萬勤;徐南平;華卉;劉鈺
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司
• 代理人: 徐冬濤;袁正英

1.一種檢測葡萄糖的酶電極的制備方法，其具體制備步驟如下：

1)將聚陽離子或聚陰離子電解質與酸液配制成離子水溶液，將支撐體電極進行預處理，然后浸入到聚陽離子電解質中，使支撐體電極表面帶上正電荷；或者將預處理后的支撐體浸入到聚陰離子電解質中，則使支撐體電極表面帶上負電荷；

2)將經上述步驟處理后帶上正電荷支撐體電極先浸入K₄Fe(CN)₆或K₃Fe(CN)₆和KCl的水溶液中，用N₂吹干，再浸入相同濃度的FeCl₃或(NH₄)₂Fe(SO₄)₂和KCl的水溶液中，用N₂吹干；或者是將處理后帶上負電荷支撐體電極先浸入FeCl₃或者(NH₄)₂Fe(SO₄)₂和KCl的水溶液中，用N₂吹干再浸入相同濃度的K₄Fe(CN)₆或者K₃Fe(CN)₆和KCl的水溶液，用N₂吹干；

3)重復步驟2)1-80次，得到聚電解質/普魯士藍膜電極；

4)分別配制葡萄糖氧化酶溶液和兩種不同濃度的明膠溶液，明膠溶液2的濃度要大于明膠溶液1的濃度；取葡萄糖氧化酶溶液與明膠溶液1混合均勻；移取上述混合溶液均勻滴于步驟3)制得的電極上，置于冰箱中；然后再將處理后的電極表面浸漬到明膠溶液2中后取出，置于冰箱中后取出，得高靈敏度的檢測葡萄糖的酶電極。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是所述的聚陰離子電解質為聚苯乙烯磺酸鈉、聚乙烯磺酸鹽、硫酸葡聚糖、硫酸軟骨素、海藻酸鈉、聚丙烯酸鈉、聚甲基丙烯酸、肝素或硫酸肝素中的一種或其中任意兩種的混合物；所述的聚陽離子電解質為聚烯丙基胺鹽、聚聯丙烯基二甲基銨氯化物、聚乙烯醇、膠原、殼聚糖、多聚賴氨酸或聚乙烯基亞胺鹽酸鹽中的一種或其中任意兩種的混合物。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于聚陰離子或聚陽離子電解質與酸液配制成離子水溶液中，聚陰離子或聚陽離子電解質的濃度為0.005-0.05mol/L，離子溶液的pH值控制在1-4。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是所述的支撐體電極為金屬電極或玻璃電極。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于重復步驟2)次數為5-40次，得到聚電解質/普魯士藍膜電極。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟2)的水溶液中K₄Fe(CN)₆、K₃Fe(CN)₆、FeCl₃或者(NH₄)₂Fe(SO₄)₂濃度為1-500mM，KCl濃度為0.1-0.5M。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟2)中的支撐體電極在K₄Fe(CN)₆或K₃Fe(CN)₆和KCl的水溶液，或者在相同濃度的FeCl₃或(NH₄)₂Fe(SO₄)₂和KCl水溶液中的浸入時間分別為20s-2min。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟4)中葡萄糖氧化酶溶液的濃度100-10000IU/ml，明膠溶液1的質量百分濃度為0.1-1.5％，明膠溶液2的質量百分濃度為2-4％的。

9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟4)中移取葡萄糖氧化酶溶液與明膠溶液1體積比為1∶10～1∶1000混合均勻。