[發明專利]用酶工程技術生物合成谷胱甘肽的方法無效
| 申請號: | 200710020902.1 | 申請日: | 2007-04-03 |
| 公開(公告)號: | CN101054560A | 公開(公告)日: | 2007-10-17 |
| 發明(設計)人: | 吳梧桐;勞興珍;鄭珩;李薇 | 申請(專利權)人: | 中國藥科大學 |
| 主分類號: | C12N1/16 | 分類號: | C12N1/16;C12P21/02;C12N11/04;C07K1/18 |
| 代理公司: | 南京蘇科專利代理有限責任公司 | 代理人: | 孫立冰 |
| 地址: | 210009*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 工程技術 生物 合成 谷胱甘肽 方法 | ||
1、一種含有谷胱甘肽合成酶的菌株,保藏號是:CGMCC?No.1917。
2、權利要求1的菌株用于制備谷胱甘肽的用途。
3、一種生物合成谷胱甘肽的方法,包括:將權利要求1的菌株用海藻酸鈉包埋法制備固定化細胞;固定化細胞在含有0.1~1%膽酸鈉的底物溶液中進行活化、轉化、分離。
4、權利要求3的方法,其中海藻酸鈉包埋法包括:篩選菌株經培養2~3天,收集濕菌體細胞懸浮于生理鹽水中,另取海藻酸鈉溶于生理鹽水中,加熱溶解,將兩者按1∶1~2∶1的比例混合攪拌均勻,以5~12號針頭將混合物擠入0.1~1mol/L氯化鈣溶液中,同時緩慢攪拌使成形,4℃靜置4~24小時,用生理鹽水洗滌。
5、權利要求3的方法,其中反應底物含:L-谷氨酸0.01~0.1mol/L、L-半胱氨酸0.01~0.1mol/L、L-甘氨酸0.01~0.1mol/L、葡萄糖1~10%、氯化鎂0.01~0.2mol/L、pH8.0的Tris緩沖液0.1mol/L。
6、權利要求3的方法,其中轉化包括:將活化的固定化細胞裝柱,在37℃下恒溫水循環,形成連續柱反應器,將底物溶液逆行通過連續反應器,使底物轉化成產物谷胱甘肽。
7、權利要求3的方法,其中分離時先后用732陽離子交換樹脂和707陰離子交換樹脂進行分離純化。
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