[發明專利]酶解癩葡萄蛋白制備降血糖活性肽工藝

無效

• 申請號: 200710019364.4
• 申請日: 2007-01-18
• 公開（公告）號: CN101225425A
• 公開（公告）日: 2008-07-23
• 發明（設計）人: 顧小紅;袁曉晴;蔣再良;湯堅
• 申請（專利權）人: 江南大學;無錫市富仁生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;A61P3/10
• 代理公司: 宜興市天宇知識產權事務所
• 代理人: 曹衛華

技術領域

本發明涉及一種利用堿性蛋白酶Alcalase酶解制備癩葡萄降糖活性肽的方法。

技術背景

癩葡萄屬葫蘆科，是一種蔓性植物，醫學上稱山苦瓜，但與食用苦瓜不同。癩葡萄的果實富含皂甙、多糖和多肽蛋白等生物活性物質，具有降血脂、降血糖等保健功能。目前從苦瓜中提取的兩種活性肽多肽-P和MC6都是從原料中直接提取，但天然存在的活性肽含量低。因癩葡萄中的蛋白含量豐富，利用這部分蛋白來酶解制備癩葡萄降糖活性肽將利于癩葡萄的綜合利用，而通過酶解方法制備降血糖活性肽至今尚未見有報道。

發明內容

本發明提供了一種通過酶水解癩葡萄蛋白制備降糖活性肽工藝，獲得的肽含量高，降血糖功效明顯，促進了癩葡萄的綜合利用。具體是這樣來實施的：酶解癩葡萄蛋白制備降血糖活性肽工藝，其特征在于將癩葡萄蛋白干粉加水溶解成質量濃度為4-8％的底物，添加堿性蛋白酶Alcalase，加酶量為癩葡萄蛋白干粉重量的1-2％；酶解pH值為8.5-9.5，酶解溫度為55-62℃，水解度(DH)達到8-12％時終止反應。以工藝將癩葡萄蛋白酶解后，通過四氧嘧啶型糖尿病小鼠驗證其降糖活性，結果表明，癩葡萄蛋白不具有降糖活性，其酶解物具有顯著的降糖活性。

本工藝采用的癩葡萄蛋白干粉由癩葡萄果實提取干燥而得，酶解時，為使酶解效率高，最佳的參考指標為：底物濃度5-6％(質量濃度)，堿性蛋白酶Alcalase加酶量為癩葡萄蛋白干粉重量的1.4-1.6％；酶解pH值為9-9.5，酶解溫度為58-60℃，水解度(DH)達到11％時終止反應。經Alcalase酶水解后，酶解產物具有顯著的降血糖作用，其中DH為11時的酶解產物降血糖作用最強。

本工藝擴大了癩葡萄的應用范圍，通過Alcalase酶解制備癩葡萄降糖活性肽，得到癩葡萄蛋白酶解物后，通過四氧嘧啶型糖尿病小鼠驗證其降糖活性，癩葡萄蛋白不具有降糖活性，其酶解物具有顯著的降糖活性。

具體實施方式

實施例1，酶解癩葡萄蛋白制備降血糖活性肽工藝，將癩葡萄蛋白干粉加水溶解成質量濃度為4％的底物，添加堿性蛋白酶Alcalase，加酶量為癩葡萄蛋白干粉重量的2％，酶解pH值為8.5，酶解溫度為62℃，水解度(DH)達到8％時終止反應。

實施例2.酶解癩葡萄蛋白制備降血糖活性肽工藝，將癩葡萄蛋白干粉加水溶解成質量濃度為5％的底物，添加堿性蛋白酶Alcalase，加酶量為癩葡萄蛋白干粉重量的1.6％，酶解pH值為9.5，酶解溫度為60℃，水解度(DH)達到10％時終止反應。

實施例3.酶解癩葡萄蛋白制備降血糖活性肽工藝，將癩葡萄蛋白干粉加水溶解成質量濃度為6％的底物，添加堿性蛋白酶Alcalase，加酶量為癩葡萄蛋白干粉重量的1％，酶解pH值為9，酶解溫度為58℃，水解度(DH)達到12％時終止反應。

實施例4.酶解癩葡萄蛋白制備降血糖活性肽工藝，將癩葡萄蛋白干粉加水溶解成質量濃度為8％的底物，添加堿性蛋白酶Alcalase，加酶量為癩葡萄蛋白干粉重量的1.4％，酶解pH值為9.5，酶解溫度為55℃，水解度(DH)達到11％時終止反應。

實施例5.酶解癩葡萄蛋白制備降血糖活性肽工藝，將癩葡萄蛋白干粉加水溶解成質量濃度為5％的底物，添加堿性蛋白酶Alcalase，加酶量為癩葡萄蛋白干粉重量的1.5％，酶解pH值為9，酶解溫度為60℃，水解度(DH)達到11％時終止反應。

上述實施例中，酶解均能獲得降糖效果較好的酶解產物，尤以實施例5的酶解產物降血糖作用最強。