[發明專利]嶗山食用牛肝菌液體菌種的培養方法

有效

• 申請號: 200710015144.4
• 申請日: 2007-07-19
• 公開（公告）號: CN101130755A
• 公開（公告）日: 2008-02-27
• 發明（設計）人: 韓怡
• 申請（專利權）人: 青島大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司
• 代理人: 王連君

技術領域

本發明涉及食用菌液體菌種的培養方法，特別涉及其中的產自于山東青島嶗山的嶗山食用牛肝菌液體菌種的培養方法。

背景技術

美味牛肝菌屬于擔子菌綱散菌目、牛肝菌科牛肝菌屬，據報道，美味牛肝菌含有二十種多氨基酸，多種礦物質、維生素和多糖，具有協調內分泌、提高人體免疫機能和顯著的抗腫瘤活性。液體培養是微生物產品大規模生產的基本方法，它可在短時間內獲得大量生物產品，該法具有不受環境與氣候條件的限制，重復性好，工藝易于放大，而且安全性不用懷疑的優點。由于美味牛肝菌是菌根菌，目前不能人工栽培，野生資源不能滿足人們的需要，液體發酵培養取代子實體的體外培養是解決這一問題的有效辦法。目前，研究人員分離了一牛肝菌菌株，研究了PDA培養基中的葡萄糖、培養基的pH、培養溫度對該菌株液體培養的影響，結果表明，該菌株在培養基中添加60mg/ml葡萄糖、pH5.5-6.0培養溫度為26℃時，該菌生長良好，多糖產量為6.7mg/ml；還采用響應曲面法對影響牛肝菌(Boletus?sp.)ACCC50328產糖與生長的工藝參數，發酵溫度、發酵時間和裝液量的最佳水平范圍進行了研究和探討，確定了馬鈴薯培養基中添加5g/L葡萄糖、22g/L的麥芽糖、14g/L的酵母膏、0.5g/L?KH₂PO4、2.7g/L(NH₄)₂SO₄、0.067g/LFeSO₄、100μg/L?CuSO₄適于該菌生長，最適生長溫度為26.77℃，最佳培養時間為10.9天，裝液量為64.90ml。還有研究人員對美味牛肝菌(Boletus?edulis)深層發酵條件及菌絲體的主要營養成分進行了研究，結果表明，最適培養基配方為：葡萄糖30.0g，玉米粉20.0g，酵母膏7.0g，KH₂PO₄?2.0g，MgSO₄.7H₂O?1.0g，VB10.01g，CaCO₃?2.0g，最優發酵條件的初始pH5.2-5.8，振蕩速度180r/min，培養溫度27℃，三角瓶裝液量為60ml。此外，適合食用菌培養的培養基和培養工藝還有很多種，中國專利00123385.8公開了一種利用酒精廢糟液添加了淀粉、蔗糖、酵母粉配置的培養基，通過深層發酵生產食用藥用菌種的制備方法；中國專利01114001.1公開了一種食用菌液體菌種的培養基和培養方法。該培養基含有土豆汁、紅塘、蛋白胨、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、硫酸鋅、VB1、瓊脂等，培養方式為含有空氣提升管的罐體發酵培養；中國專利200410001084.7還公開一種食用菌液體菌種深層發酵工藝，該工藝涉及母種培養基、一級發酵培養基和深層發酵培養基，主要成分有葡萄糖、酵母膏、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、棉子皮粉、玉米粉、蛋白胨、麩皮、闊葉木屑、瓊脂等成分。

產自于山東青島嶗山的嶗山食用牛肝菌子實體飽滿，味道鮮美，營養豐富，但受氣候季節條件限制產量不高，需要通過發酵大量獲得菌絲體以滿足其在食品等行業的應用，但目前已報道的培養基和培養條件對制備嶗山牛肝菌菌種及液體培養效果并不理想，因此迫切需要提供新的嶗山食用牛肝菌液體菌種的培養方法。

發明內容

本發明的任務在于提供一種新的嶗山牛肝菌液體菌種的培養方法，該方法能快速地進行嶗山牛肝菌菌絲體的液體發酵培養。

其技術解決方案是：

一種嶗山食用牛肝菌液體菌種的培養方法，包括步驟：

a使用菌種制備培養基培養嶗山食用牛肝菌離體部分子實體制備菌種，上述的菌種制備培養基由下述原料及重量份配制而成。

馬鈴薯??????????190～210

葡萄糖??????????18～21

松根細粉????????15～25

維生素B1????????0.0008～0.0012

瓊脂????????????12～18

蒸餾水??????????1000

pH值????????????4.6～5.0

上述步驟a中，包括步驟：

a1將新鮮馬鈴薯洗凈，去皮，切成小塊，稱取；量取蒸餾水，放入大燒杯中煮沸后加入馬鈴薯及松根細粉，小火煮沸30分鐘，然后過濾取濾液，在濾液中加入瓊脂、葡萄糖，煮至瓊脂完全溶解，調節pH值為4.8，在121℃條件下高溫滅菌30分鐘；待滅菌完成后，取出冷卻至50℃，加入維生素B1母液，混勻，在超凈工作臺上倒平皿，凝固后即可使用。