[發明專利]SEC2超抗原基因工程肽及其編碼基因和異源表達方法

無效

• 申請號: 200710011177.1
• 申請日: 2007-04-30
• 公開（公告）號: CN101298474A
• 公開（公告）日: 2008-11-05
• 發明（設計）人: 張成剛;王小剛;張惠文;陳艷;徐明愷;常迪;蘇振成
• 申請（專利權）人: 沈陽科健生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/31
• 分類號: C07K14/31;C12N15/31
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司
• 代理人: 許宗富

1.SEC2超抗原基因工程肽，其特征在于：分別為下列任意氨基酸序列之一，

SEC2-1具有序列表SEQ?ID?NO：2中氨基酸序列；

SEC2-2具有序列表SEQ?ID?NO：4中氨基酸序列；

SEC2-3具有序列表SEQ?ID?NO：6中氨基酸序列；

SEC2-4具有序列表SEQ?ID?NO：8中氨基酸序列；

SEC2-5具有序列表SEQ?ID?NO：10中氨基酸序列；

SEC2-6具有序列表SEQ?ID?NO：12中氨基酸序列；

SEC2-7具有序列表SEQ?ID?NO：14中氨基酸序列；

SEC2-8具有序列表SEQ?ID?NO：16中氨基酸序列；

SEC2-9具有序列表SEQ?ID?NO：18中氨基酸序列；

SEC2-10具有序列表SEQ?ID?NO：20中氨基酸序列；

SEC2-11具有序列表SEQ?ID?NO：22中氨基酸序列；

SEC2-12具有序列表SEQ?ID?NO：24中氨基酸序列；

SEC2-13具有序列表SEQ?ID?NO：26中氨基酸序列；

或SEC2-14具有序列表SEQ?ID?NO：28中氨基酸序列。

2.一種權利要求1所述基因工程肽的編碼基因，其特征在于：分別對應于下列核苷酸序列之一，

SEC2-1對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：1中堿基序列；

SEC2-2對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：3中堿基序列；

SEC2-3對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：5中堿基序列；

SEC2-4對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：7中堿基序列；

SEC2-5對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：9中堿基序列；

SEC2-6對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：11中堿基序列；

SEC2-7對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：13中堿基序列；

SEC2-8對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：15中堿基序列；

SEC2-9對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：17中堿基序列；

SEC2-10對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：19中堿基序列；

SEC2-11對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：21中堿基序列；

SEC2-12對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：23中堿基序列；

SEC2-13對應的基因具有序列表SEQ?ID?NO：25中堿基序列；

或SEC2-14對應的基因具有序列表SEQID?NO：27中堿基序列。

3.一種權利要求1所述SEC2超抗原基因工程肽的異源表達方法，其特征在于：

將編碼這一系列SEC2超抗原基因工程肽的核苷酸序列sec2-1、sec2-2、sec2-3、sec2-4、sec2-5、sec2-6、sec2-7、sec2-8、sec2-9、sec2-10、sec2-11、sec2-12、sec2-13或sec2-14分別克隆入表達載體pET-28a，以大腸桿菌BL21為宿主菌，構建成異源表達超抗原活性基因工程肽的基因工程菌，在培養基中異源表達有超抗原活性的SEC2-1、SEC2-2、SEC2-3、SEC2-4、SEC2-5、SEC2-6、SEC2-7、SEC2-8、SEC2-9、SEC2-10、SEC2-11、SEC2-12、SEC2-13或SEC2-14基因工程肽。

4.按照權利要求3所述異源表達方法，其特征在于：

所述編碼SEC2超抗原基因工程肽的核苷酸序列的克隆方法如下，

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-1-F：??5’gAATTCgAgAgTCAACCAgACCCTA?3’和sec2-1-R：5’gCCTCgAgTTATTTTATgTCTAgTTC?3’通過PCR技術擴增出sec2-1基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-2-F：5’gAATTCgAgAgTCAACCAgACCCTAC?3’和sec2-2-R：5’gCTCgAgTTAgTggTTTCCTTCATg?3’通過PCR技術擴增出sec2-2基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-3-F：5’gAATTCgAgAgTCAACCAgA?3’和sec2-3-R：5’gCCTCgAgTTATCCATACATACAAg?3’通過PCR技術擴增出sec2-3基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-4-F：5’GAATTCGAGAGTCAACCAGACCCTA?3’和sec2-4-R：5’gCTCgAgTTATTTTgTTATTCCTCCA?3’通過PCR技術擴增出sec2-4基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-5-F：5’gAATTCggTACgATgggTAATATg?3’和sec2-5-R：5’CTCgAgTTATCCATTCTTTgTTgTAAggT?3’通過PCR技術擴增出sec2-5基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-6-F：5’gAATTCggTACgATgggTAATATg?3’和sec2-6-R：5’CTCgAgTTATTTTgTTATTCCTCCAT?3’通過PCR技術擴增出sec2-6基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-7-F：5’gAATTCggTACgATgggTAATATg?3’和sec2-7-R：5’CgCTCgAgTTATCCATACATACAAg?3’通過PCR技術擴增出sec2-7基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-8-F：5’gAATTCgCAAAgAAgTACAAAgATg?3’和sec2-8-R：5’CgCTCgAgTTATTTTATgTCTAgTTC?3’通過PCR技術擴增出sec2-8基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-9-F：5’ggAATTCgAgAgTCAACCAgACCCTA?3’和sec2-9-R：5’CgCTCgAgTTATCCATACACATCAAC?3’通過PCR技術擴增出sec2-9基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-10-F：5’gAATTCgAgAgTCAACCAgAC?3’和sec2-10-R：5’CgCTCgAgTTAATCTTTgTACTTC?3’通過PCR技術擴增出sec2-10基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-11-F：5’gAATTCgAgAgTCAACCAgACCCTA?3’和sec2-11-R：5’CCCgCTCgAgTTAGTTTACATAgTAAT?3’通過PCR技術擴增出sec2-11基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-12-F：5’gAATTCAAATCAAgTgAgTTTACTg?3’和sec2-12-R：5’CgCTCgAgTTAgTTTACATAgTAAT?3’通過PCR技術擴增出sec2-12基因片段；

以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-13-F：5’gAATTCggTACgATgggTAATAT?3’和sec2-13-R：5’CCgCTCgAgTTAgTTTACATAgTAA?3’通過PCR技術擴增出sec2-13基因片段；

或，以金黃色葡萄球菌基因組DNA為模板，采用引物sec2-14-F：5’gAATTCgAgAgTCAACCAgACCCTA?3’和sec2-14-R：5’CgCTCgAgTTATAATAACTCTgTTTTCAC?3’通過PCR技術擴增出sec2-14基因片段。