[發明專利]用于誘導未成熟單核細胞的樹突細胞的激活的組合物和方法

無效

• 申請號: 200680052028.3
• 申請日: 2006-12-08
• 公開（公告）號: CN101336291A
• 公開（公告）日: 2008-12-31
• 發明（設計）人: A·L·博因頓;M·L·博希
• 申請（專利權）人: 西北生物治療藥物公司
• 主分類號: C12N5/06
• 分類號: C12N5/06;C12N5/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 羅菊華

相關應用

本申請要求2005年12月8日提交的美國臨時申請60/748,885 的優先權，通過引用將其包含入本文。

發明背景

抗原遞呈細胞(APC)在引發有效的免疫反應中是非常重要的。它 們不僅將抗原呈遞至具有抗原特異性T細胞受體的T細胞，而且還提 供了T細胞激活所必需的信號。這些信號仍未完全確定，但牽涉許多 細胞表面分子和細胞因子或生長因子。幼稚型T細胞的激活和極化所 必需的因子可以與記憶性T細胞的再激活所需的因子不同。APC為T 細胞提供抗原和遞送信號的能力通常稱為輔助細胞功能(accessory cell?function)。盡管已顯示單核細胞和B細胞是感受態(competent) APC，但它們的體外抗原呈遞能力似乎限于之前致敏的T細胞的再激 活。因此，單核細胞和B細胞不能直接功能性激活幼稚型或未接觸抗 原的T細胞群體。它們也不能遞送可極化誘導的免疫反應或當其被誘 導的時的免疫反應的信號。

樹突細胞(DC)是免疫系統的據認為能夠激活幼稚型和記憶性T 細胞的專職抗原遞呈細胞。日益增多地離體制備樹突細胞以用于免疫 治療，特別是癌癥的免疫治療。具有最佳免疫刺激性質的樹突細胞的 制備需要理解和利用這些細胞的生物學知識以用于進行離體培養。已 描述了用于這些細胞培養的各種方案，所述方案具有歸于各方案的不 同有利方面。最近的方案包括無血清培養基的使用，賦予培養的細胞 以希望的免疫刺激性質的成熟條件的應用。

樹突細胞的激活起始了將未成熟DC(其表型與皮膚郎格漢斯細胞 相似)轉變成成熟的、能夠遷移至淋巴結的抗原遞呈細胞的過程。該 過程導致表征未成熟樹突細胞的強抗原攝取能力的漸近和累進丟失以 及導致共刺激細胞表面分子和各種細胞因子的表達上調。不同的刺激 物可起始DC的成熟。該過程非常復雜且在體外至少可花費48小時才 能完成。成熟的一個其他結果是細胞的體內遷移性質的改變。例如， 成熟誘導幾個趨化因子受體，包括CCR7，所述受體指導細胞至引流淋 巴結的T細胞區域，在該區域成熟DC激活T細胞，所述T細胞抗DC 表面呈遞的I類和II類MHC分子背景中的抗原。術語“激活”和“成 熟”以及“激活的”和“使成熟”描述了誘導和完成從未成熟DC(部 分特征在于攝取抗原的能力)至成熟DC(部分特征在于有效地刺激從 新形成的T細胞反應的能力)的轉變。所這術語在本領域內通常可互 換使用。

已知的成熟方案基于據認為DC在暴露于抗原期間或之后遇到的 體內環境。該方法的最佳實例是將單核細胞條件化的培養基(MCM)用作 細胞培養基。通過培養單核細胞在體外產生MCM，并且將其用作成熟 因子的來源。(參見例如，美國2002/0160430，通過引用包含入本文)。 MCM中負責成熟的主要成分據報導為(促)炎癥細胞因子白細胞介素1 β(IL-1β)、白細胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNFα)。

因此可通過許多不同的因子觸發DC的成熟，所述因子通過宿主 參與信號轉導途徑。作為結果，不存在單一的成熟途徑或結果，但事 實上存在許多成熟DC策略，其各自具有它們自身的獨特的功能特征。 從概念上來說這是這個道理，因為免疫系統必須對其作出反應的對身 體的各種威脅是多方面的，因此這需要不同的攻擊策略。例如，在通 過補充以特定抗體的、激活的巨噬細胞充分清除細菌感染，通過有效 地殺死病毒感染的細胞的細胞毒性T細胞充分攻擊病毒感染的時候。 癌細胞的殺死通常牽涉細胞毒性T細胞、天然殺傷細胞和抗體的結合。