[發明專利]用于生產蛋白的轉基因蘆薈植物及其相關的方法

有效

• 申請號: 200680043903.1
• 申請日: 2006-09-26
• 公開（公告）號: CN101313071A
• 公開（公告）日: 2008-11-26
• 發明（設計）人: W·J·勞瑟;W－S·約;K·洛里克;M·佩奇斯;N·J·勞特
• 申請（專利權）人: 綠色細胞有限公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種在植物中生產一種對所述植物外源的蛋白的方法，所述方法包 含：

提供包含一種DNA構建體的轉基因植物，所述DNA構建體包 含一個啟動子、一個編碼所述外源蛋白的序列、一個終止序列和一 個編碼一種分泌信號肽的易位序列，其中所述啟動子是SEQIDNO: 44編碼的來自玉米的泛素啟動子，所述易位序列是SEQIDNO:29 編碼的來自水稻(Oryzasativa)的α淀粉酶分泌序列，并且所述外源 蛋白是由SEQIDNO:33編碼的α-2干擾素；

增殖所述植物以便表達來自所述DNA構建體的外源蛋白；和

從所述植物提取所述蛋白；

其中所述植物是蘆薈；所述DNA構建體包含一種分泌信號肽， 使得至少部分的所述外源的蛋白被易位到所述蘆薈葉的凝膠中；并 且提取存在于所述葉凝膠中的外源蛋白。

2.根據權利要求1的方法，其中所述分泌信號肽是一種包括在所述外 源蛋白中的天然的或合成的結構域，所述分泌信號肽靶向所述外源 蛋白的分泌。

3.根據權利要求1的方法，其中在所述蛋白從所述蘆薈細胞中易位出 來的時候，所述分泌信號肽被從所述外源蛋白上切除。

4.根據權利要求1的方法，其中在所述蛋白從所述蘆薈細胞中易位出 來的時候，所述分泌信號肽保留在所述外源蛋白上。

5.一種轉基因蘆薈植物的凝膠，包含：

由一種DNA構建體表達的一種外源蛋白，所述DNA構建體具 有一個啟動子、一個編碼所述外源蛋白的序列、一個終止序列和一 個編碼一種分泌信號肽的易位序列，并且至少部分的所述外源蛋白 是從所述轉基因蘆薈植物的蘆薈細胞被易位到蘆薈葉的凝膠中，

其中所述啟動子是SEQIDNO:44編碼的來自玉米的泛素啟動 子，所述易位序列是SEQIDNO:29編碼的來自水稻(Oryzasativa) 的α淀粉酶分泌序列，并且所述外源蛋白是由SEQIDNO:33編碼 的α-2干擾素。

6.一種治療組合物，所述組合物包含：

包含一種或多種天然的和治療性蘆薈蛋白或碳水化合物的蘆 薈葉凝膠；和

一種有生物活性的且對蘆薈外源的蛋白，所述蛋白由重組的 DNA構建體表達，所述構建體包含：一個啟動子、一個編碼所述外 源蛋白的序列、一個終止序列和一個編碼一種分泌信號肽的易位序 列，其中至少部分的所述外源蛋白從蘆薈細胞被易位到所述蘆薈葉 的凝膠中；

其中所述啟動子是SEQIDNO:44編碼的來自玉米的泛素啟動 子，所述易位序列是SEQIDNO:29編碼的來自水稻(Oryzasativa) 的α淀粉酶分泌序列，并且所述外源蛋白是由SEQIDNO:33編碼 的α-2干擾素。

7.一種用于產生生物活性蛋白的方法，所述方法包含：

提供一種DNA構建體，所述DNA構建體含有一個啟動子、一 個編碼所述外源蛋白的序列、一個終止序列和一個編碼一種分泌信 號肽的易位序列，其中所述啟動子是SEQIDNO:44編碼的來自玉 米的泛素啟動子，所述易位序列是SEQIDNO:29編碼的來自水稻 (Oryzasativa)的α淀粉酶分泌序列，并且所述外源蛋白是由SEQID NO:33編碼的α-2干擾素；

把所述DNA構建體克隆到蘆薈植物的基因組中；

繁殖所述包含所述DNA構建體的蘆薈植物；

由所述DNA構建體表達所述外源蛋白，其中至少部分的所述 外源蛋白從所述蘆薈植物的蘆薈細胞被易位到蘆薈葉的凝膠中；和

提取由所述DNA構建體表達的所述外源蛋白。

8.根據權利要求7的方法，其中所述方法還包含誘導編碼所述外源蛋 白的基因的轉錄的步驟。

9.根據權利要求7的方法，其中所述提取所述外源蛋白的步驟包含從 所述蘆薈葉提取凝膠。

10.根據權利要求7的方法，其中在所述蛋白從所述蘆薈細胞中易位出 來的時候，所述分泌信號肽被從所述外源蛋白上切除。