[發明專利]莫匹羅星的提純方法

有效

• 申請號: 200680005554.4
• 申請日: 2006-02-21
• 公開（公告）號: CN101124221A
• 公開（公告）日: 2008-02-13
• 發明（設計）人: M·A·T·比斯喬普斯;T·G·P·雷金斯;A·馬蒂森;L·奧斯韋恩
• 申請（專利權）人: 阿爾法馬股份公司
• 主分類號: C07D407/06
• 分類號: C07D407/06
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 唐曉峰

發明領域

本發明涉及一種提純抗生素莫匹羅星(假單胞菌酸A)的方法。

發明背景

已知螢光假單胞菌菌株可以用生物學方法合成。除假單胞菌酸A外，少量的其他相關抗生素用字母B-D命名[E.B.Chain，G.Mellows，J.Chem.Soc.Perkin?Trans?I.318(1977)；J.P.Clayton?et?al.，Tetrahedron?Lett.，21，881(1980)；P.J.O.Hanlon，N.H.Rogers，J.Chem.Soc.Perkin?Trans?I.2665(1983)]。從治療的角度上看，在這些假單胞菌酸抗生素中最有價值的是假單胞菌酸A，其具有主要對抗革蘭氏陽性菌生長抑制的功效。

從含有培養液的抗生素復合物中分離假單胞菌酸A的一種方法是液液提取。依照德國專利號2227739和美國專利號4289703，其是將可溶性鋇鹽加至發酵液中，然后通過離心分離具有不溶性惰性物質的微生物細胞，并且最后用甲基異丁基甲酮(MIBK)萃取抗生素。然后通過堿性水從甲基異丁基甲酮中萃取出抗生素，并且產生的堿性水萃取物用甲基異丁基甲酮再萃取而凈化。色譜分析獲得的產物，并從莫匹羅星酸抗生素復合物中制備其酯衍生物，并用制備薄層色譜純化。通過水解獲得酸形式的純抗生素。

比利時專利號870,855涉及一種用甲基異丁基甲酮萃取培養基并通過碳酸氫鈉溶液從萃取物中萃取活性物質的方法。過濾在堿性水中不溶解的物質而分離，然后酸化濾液的pH，并用甲基異丁基甲酮萃取。最后，通過濃縮萃取物并從甲基異丁基甲酮-正-庚烷混合物中結晶而獲得假單胞菌酸A。

美國專利號4222942涉及一種分離莫匹羅星的方法，其通過在具有水介質的與水不混溶的有機溶劑中萃取粗品莫匹羅星制劑的溶液，降低所述水溶液的pH，并用極性水不相混溶的有機溶劑萃取該溶液，此后加入充分非極性的稀釋劑以降低所述極性有機溶劑極性，但是該稀釋劑與所述極性有機溶劑是可混溶的，以便影響莫匹羅星的結晶。該反應方案的步驟有很多，因而該方案需要大量的溶劑。

美國專利6254921公開了一種分離莫匹羅星的方法，其包括使用氯化脂肪烴或醋酸異丁酯萃取酸化的培養基，這樣可以獲得含有莫匹羅星的萃取物；并通過水相與有機相之間萃取物的分配從所述萃取物中提純莫匹羅星，所述有機相含有至少一種有機溶劑和蒸發用的有機溶劑。

上述方法都不能在商業和生態角度上令人滿意。因此，仍然需要一種提純莫匹羅星的新方法，其不具有至少一些已知方法和應用的缺點，在生產規模上可以致使上述提及抗生素回收的高收率。

本發明提供一種提純莫匹羅星的方法，其具有至少一些上述定義的經濟學上健全的目標，優選具有較小生態上的有害性，并且產生具有高純度高收率的莫匹羅星。該方法包括從莫匹羅星的水溶液中沉淀莫匹羅星，并在有機溶劑中溶解該沉淀物。

本發明涉及一種提純抗生素莫匹羅星的方法，其包括步驟：

a)從莫匹羅星的水溶液中沉淀莫匹羅星；

b)回收沉淀物；

c)在有機溶劑中溶解沉淀物；并且任選

d)從溶劑中回收莫匹羅星。

術語“莫匹羅星”是指含有任何如上提及參考中定義的莫匹羅星，也包括天然產生的以及合成的其衍生物。該術語包括其酸的形式和鹽類，例如鈣鹽，也包括他們的溶劑化物和多晶型物。

在本發明的一個實施方案中，莫匹羅星的溶液是發酵液，例如澄清的發酵液，例如通過離心分離或過濾而澄清。發酵液的來源并不重要，可以如現有技術公開的獲得發酵液，例如如上述提及參考的US3977943、4071536和4289703、WO?00/46389或WO?03/000910公開的那樣。任選地，發酵液可以在沉淀莫匹羅星之前濃縮。還可以使用不同于發酵液的溶液，例如源于莫匹羅星或其衍生物化學合成的溶液。

可以通過加入酸而將莫匹羅星從水溶液中析出，該酸例如選自包括醋酸、檸檬酸、硫酸和鹽酸組成的組。當使用酸時，沉淀過程中的pH適宜地是在2.0至6.0的范圍，優選在3.5至5.0的范圍，并且最優選在4.2至4.6的范圍。在一個實施方案中，溶液留置攪拌例如10-40分鐘的時間直至莫匹羅星析出。

含有莫匹羅星的沉淀可以通過離心分離或過濾回收，優選離心分離?？梢酝ㄟ^在凝膠形成的條件下實現離心分離，例如以5000-15000g離心分離5-30分鐘，或者以5000-15000g在連續離心機中離心分離。