[發(fā)明專利]分離和純化核酸的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200680003744.2
• 申請(qǐng)日: 2006-03-02
• 公開（公告）號(hào): CN101120089A
• 公開（公告）日: 2008-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 竹下由美子;駒澤宏幸;渡邊信一
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 富士膠片株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C12N15/09
• 分類號(hào): C12N15/09;C12M1/00
• 代理公司: 北京天昊聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 丁業(yè)平;張?zhí)焓?/td>

1.一種分離和純化核酸的方法，該方法包括：

(1)將含有核酸的樣品溶液與固相接觸，從而使所述核酸吸附到所述固相上的步驟；

(2)將洗滌液與所述固相接觸，從而在所述核酸被吸附在所述固相上的狀態(tài)下洗滌所述固相的步驟；和

(3)將回收液與所述固相接觸，從而使所述核酸從所述固相上解吸附的步驟；

其中，所述樣品溶液是通過包括去除沉淀成分并將表面活性劑和水溶性有機(jī)溶劑加入該沉淀的上清液中的步驟的方法制備的。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述表面活性劑是非離子表面活性劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述表面活性劑是聚氧化亞乙基類表面活性劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述表面活性劑是聚氧化亞乙基失水山梨糖醇表面活性劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述樣品溶液是通過向含有核酸的樣品中加入預(yù)處理液而制得的，所述預(yù)處理液含有選自離液鹽、消泡劑、核酸穩(wěn)定劑、緩沖劑、酸劑、堿劑和酶中的至少一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法，

其中所述固相為膜狀固相。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述水溶性有機(jī)溶劑包含選自甲醇、乙醇、丙醇及其異構(gòu)體和丁醇及其異構(gòu)體中的至少一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述固相包含二氧化硅或其衍生物、硅藻土或者氧化鋁。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法，

其中所述固相包含有機(jī)聚合物。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述固相包含選自Teflon(注冊(cè)商標(biāo))、聚酯、聚醚砜、聚碳酸酯、聚丙烯酸酯共聚物、聚氨酯、聚苯并咪唑、聚烯烴、聚氯乙烯和聚偏氟乙烯中的至少一種。

11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述固相包含帶正電荷或負(fù)電荷的尼龍。

12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述有機(jī)聚合物具有多糖結(jié)構(gòu)。

13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分離和純化核酸的方法，

其中，所述有機(jī)聚合物包含選自纖維素、纖維素混合酯、硝酸纖維素、醋酸纖維素和硝化纖維素中的至少一種。

14.一種裝置，其用于自動(dòng)實(shí)施根據(jù)權(quán)利要求1至13中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法中的步驟。

15.一種成套用具，其用于實(shí)施根據(jù)權(quán)利要求1至13中任意一項(xiàng)所述的分離和純化核酸的方法，該成套用具包括：

(i)核酸分離純化柱；

(ii)表面活性劑；

(iii)預(yù)處理液，其含有選自離液鹽、消泡劑、核酸穩(wěn)定劑、緩沖劑、酸劑、堿劑和酶中的至少一種；

(iv)洗滌液；以及

(v)回收液的試劑。