[發明專利]高純度載脂蛋白A－I的制備方法有效
| 申請號： | 200610147503.7 | 申請日： | 2006-12-20 |
| 公開（公告）號： | CN101205250A | 公開（公告）日： | 2008-06-25 |
| 發明（設計）人： | 黃凱;何秋;許必雄;包驤飛;李軍輝;沈積慧;李春洲 | 申請（專利權）人： | 上海萊士血液制品股份有限公司 |
| 主分類號： | C07K1/18 | 分類號： | C07K1/18;C07K14/775 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 200245上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 純度 脂蛋白 制備 方法 | ||
1.一種獲得載脂蛋白A-I的方法，其特征在于，它包括步驟：
a.將經Cohn低溫乙醇法獲得的組份四和1-8M的尿素混合形成組份四預處理溶液；
b.步驟a得到的組份四預處理溶液流過陰離子交換層析柱后，用含1-8M尿素，電導值1-4ms/cm的緩沖液I洗滌層析柱，得到含初步純化的載脂蛋白A-I的洗脫液I；
c.洗脫液I流過陰離子交換層析柱，用電導值1-15ms/cm的緩沖液II洗脫雜質后用電導30-100ms/cm的緩沖液III洗脫下純化的載脂蛋白A-I。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a、b中所述的尿素濃度為3-8M。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a、b中所述的尿素濃度為5-7M。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，緩沖液I的電導值為2-4ms/cm；緩沖液II的電導值為7-15ms/cm；緩沖液III的電導值為70-95ms/cm。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的陰離子交換層析柱為弱酸性或弱堿性陰離子交換層析柱。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a中組份四和尿素的重量比為1∶30-300。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b、c中的洗脫緩沖液I、II或III中含有NaCl、KCl、MgCl2或CaCl2。
8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a和b之間還包括步驟a’：將組份四預處理溶液離心除不溶性雜質，并用濾膜過濾。
9.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b和c之間還包括步驟b’：用電導值4.5-70ms/cm的緩沖液IV洗脫除去大部分雜質。
10.如權利要求1-9任一所述的方法，其特征在于，所述的各緩沖液pH7.2-8.5。
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