[發(fā)明專利]抗體敏化乳膠

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200580051674.3
• 申請(qǐng)日: 2005-07-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101273270A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 橋本敏一;三品文雄;奧村剛一;長(zhǎng)井富美子;山本修太;澤田治司
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 株式會(huì)社益力多本社
• 主分類號(hào): G01N33/545
• 分類號(hào): G01N33/545
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 羅菊華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種抗體敏化乳膠(antibody-sensitized?latex)，其用于檢測(cè)屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌所述氨發(fā)現(xiàn)于在生物污水處理系統(tǒng)中，例如在水流和活化污泥，以及在河流、湖泊和海濱的水中，和在污泥環(huán)境(soil?habitats)中。更具體地，本發(fā)明涉及與需要熟練工作和長(zhǎng)時(shí)間的常規(guī)方法不同的、能夠準(zhǔn)確并快速檢測(cè)屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌的抗體敏化乳膠。本發(fā)明還涉及通過(guò)使用所述抗體敏化乳膠測(cè)定屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌的方法，以及將所述測(cè)定應(yīng)用到生物污水處理過(guò)程控制中的方法。

背景技術(shù)

人類生活環(huán)境包含含有有機(jī)物質(zhì)或氮化合物的廢水和未處理垃圾。如果它們這樣就被排入到河流、湖泊和地下水中，會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的環(huán)境問(wèn)題。解決這個(gè)問(wèn)題的一種方法是在其處理過(guò)程中采用活化淤泥通過(guò)硝化作用和脫氮作用進(jìn)行生物凈化。此過(guò)程已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于許多污水處理設(shè)備中。此過(guò)程中的一個(gè)步驟是硝化作用，其中生活于活化淤泥中的硝化菌扮演重要的角色。

因?yàn)橄趸饔孟拗屏松镉倌嗵幚磉^(guò)程的速度，所以必須對(duì)參與硝化作用的微生物(例如硝化菌、氨氧化細(xì)菌和亞硝酸鹽氧化菌)進(jìn)行定量來(lái)改善處理的穩(wěn)定性和效率。

參與硝化作用的細(xì)菌主要是自養(yǎng)的，因此其比生長(zhǎng)速率比去除有機(jī)物質(zhì)的異養(yǎng)型細(xì)菌要小，并且它們受環(huán)境條件例如pH和水溫的影響。因此，在硝化生物反應(yīng)器中維持硝化細(xì)菌的高密度是極端重要的。

目前，根據(jù)對(duì)污水處理設(shè)備的輸入和輸出的定量分析，已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了對(duì)反應(yīng)器的操作和維持，但是幾乎沒(méi)有使用關(guān)于微生物群的信息。

因此，亞硝酸鹽氧化細(xì)菌的測(cè)定對(duì)于活化污泥池或污水處理設(shè)備中的反應(yīng)器中的生物污水處理系統(tǒng)和泥/污泥環(huán)境(habitat)是必須的。常規(guī)的間接測(cè)定方法包括取樣后培養(yǎng)1到2個(gè)月并測(cè)定這段時(shí)期內(nèi)亞硝酸的消耗量(日本文章：Ryusuke?Kimura等人，“Methods?forExperiments?on?Soil?Microorganisms”，Society?for?the?Researchof?Soil?Microorganisms，Yokendo?Co.，Ltd.，(1992)pp.207-214)。

已經(jīng)嘗試使用上述方法在活化淤泥或污泥中測(cè)定對(duì)照硝化菌，用于生物污水處理。不幸的是，上述方法需要熟練工作來(lái)測(cè)定硝化菌并且需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間，因此不適合根據(jù)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行硝化菌的即時(shí)性的每日控制。

為了應(yīng)對(duì)這種情況，開(kāi)發(fā)了一種方法來(lái)檢測(cè)屬于亞硝化單孢菌屬(銨氧化菌)和屬于硝化菌屬(亞硝酸鹽氧化細(xì)菌)的細(xì)菌，該方法使用了一種能夠特異性識(shí)別這些細(xì)菌的抗體。已經(jīng)提出使用該方法快速并簡(jiǎn)單地測(cè)定氨氧化菌和亞硝酸鹽氧化細(xì)菌(JP-5322896-A)。到目前為止提出的采用簡(jiǎn)化方法進(jìn)行檢測(cè)的另一種方法采用了敏化抗體乳膠，由乳膠顆粒以及上面吸附的所述抗體組成(JP-8029426-A)。

順便說(shuō)一句，自從1990年分子生物技術(shù)被引入到水環(huán)境分析中，關(guān)于硝化菌的分布和種群的知識(shí)正在逐步更新。在關(guān)于亞硝酸鹽氧化菌的新知識(shí)中有屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌屬(Nitrospira)的發(fā)現(xiàn)。對(duì)于這種細(xì)菌占多數(shù)的處理水的硝化過(guò)程已經(jīng)進(jìn)行了大量的報(bào)道。現(xiàn)在，精確測(cè)定(計(jì)數(shù))硝酸菌(Nitromonas)和硝化菌(Nitrobacter)以及屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌來(lái)準(zhǔn)確得知生物處理過(guò)程去除氮的效率如何是一個(gè)重要的課題。

不幸的是，上述常規(guī)檢測(cè)方法沒(méi)有產(chǎn)生合適的結(jié)果，因?yàn)樵谟蒙锛兓b置中的淤泥樣本所進(jìn)行的培養(yǎng)中，上述細(xì)菌以外的其它細(xì)菌占了多數(shù)。另一個(gè)問(wèn)題是，無(wú)法得到特異性識(shí)別屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌的任何抗體，這是因?yàn)槭聦?shí)上沒(méi)有屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌的純化方法。因此，用常規(guī)方法對(duì)屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)和測(cè)定存在困難。

發(fā)明內(nèi)容

考慮到前面所述的，本發(fā)明人進(jìn)行了一系列研究來(lái)開(kāi)發(fā)快速并且簡(jiǎn)單的測(cè)定屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌的方法，在生物污水處理系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)了該菌，例如在水流和活化污泥，以及河流、湖泊和海濱的水中，和在污泥環(huán)境中。結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了一個(gè)事實(shí)，能通過(guò)使用抗體敏化乳膠這種簡(jiǎn)單并且快速的方法檢測(cè)并測(cè)定目標(biāo)細(xì)菌，該乳膠包含一種液體介質(zhì)和懸浮其中的、上面吸附有抗體的乳膠顆粒，所述抗體對(duì)屬于亞硝化螺菌屬的細(xì)菌是特異性的。該發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致了本發(fā)明。