[發明專利]編碼甲基化兒茶素生物合成酶的基因

無效

• 申請號: 200580039299.0
• 申請日: 2005-11-14
• 公開（公告）號: CN101061222A
• 公開（公告）日: 2007-10-24
• 發明（設計）人: 山本萬里;切田雅信;佐見學;池田滿雄
• 申請（專利權）人: 獨立行政法人農業·食品產業技術綜合研究機構;朝日啤酒股份有限公司
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12N1/21;A01H5/00;C12N5/10;C12N1/15;C12N9/00;C12N1/19;C12P17/02
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所
• 代理人: 黃革生;林柏楠

1、編碼生物合成選自于通式(I)

【化1】

(式中、R¹～R⁶表示氫原子或甲基、R₁～R₆中的至少1個表示甲基)表示的表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物、通式(II)

【化2】

(式中、R₁～R₅與前述定義相同、R₁～R₅中的至少1個表示甲基)表示的表兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物以及它們的異構體的至少1種甲基化兒茶素的酶的基因，其含有選自于序列號1、3以及5表示的堿基序列的至少1個堿基序列。

2、編碼能夠發揮生物合成選自于通式(I)

【化3】

(式中、R₁～R₆表示氫原子或甲基、R₁～R₆中的至少1個表示甲基)表示的表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物、通式(II)

【化4】

(式中、R₁～R₅與前述定義相同、R₁～R₅中的至少1個表示甲基)表示的表兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物以及它們的異構體的至少1種甲基化兒茶素的酶活性的酶的基因，其中所述酶具有在選自于序列號2、4和6表示的氨基酸序列中的至少1個氨基酸序列中插入、添加、缺失或替換了1個或多個氨基酸殘基的氨基酸。

3、與選自于序列號1、3以及5表示的堿基序列群的至少1個堿基序列具有70％以上的同源性，且編碼能夠發揮生物合成選自于通式(I)

【化5】

(式中、R₁～R₆表示氫原子或甲基、R₁～R₆中的至少1個表示甲基)表示的表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物、通式(II)

【化6】

(式中、R₁～R₅與前述定義相同、R₁～R₅中的至少1個表示甲基)表示的表兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物以及它們的異構體的至少1種甲基化兒茶素的活性的生物合成酶的基因。

4、含有權利要求1-3任一項中記載的基因的重組表達載體。

5、被權利要求4中記載的重組表達載體轉化的生物體。

6、權利要求5中記載的被轉化的生物體為微生物的轉化體。

7、權利要求5中記載的被轉化的生物體為植物細胞、植物組織或植物體的轉化體。

8、生物合成選自于通式(I)

【化7】

(式中、R₁～R₆表示氫原子或甲基、R₁～R₆中的至少1個表示甲基)表示的表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物、通式(II)

【化8】

(式中、R₁～R₅與前述定義相同、R₁～R₅中的至少1個表示甲基)表示的表兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物以及它們的異構體中的至少1種甲基化兒茶素的酶的制造方法，其包括培養權利要求6-7任一項中記載的轉化體，分離純化培養物中產生的酶。

9、選自于通式(I)

【化11】

(式中、R₁～R₆表示氫原子或甲基、R₁～R₆中的至少1個表示甲基)表示的表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物、通式(II)

【化12】

(式中、R₁～R₅與前述定義相同、R₁～R₅中的至少1個表示甲基)表示的表兒茶素-3-O-沒食子酸酯衍生物以及它們的異構體中的至少1種甲基化兒茶素的制造方法，特征在于培養權利要求6-7任一項中記載的轉化體，從培養物的產生物中分離甲基化兒茶素生物合成酶，使該甲基化兒茶素生物合成酶以選自于化學式(III)

【化9】

表示的表沒食子兒茶素-3-O-沒食子酸酯、化學式(IV)

【化10】

表示的表兒茶素-3-O-沒食子酸酯以及它們的異構體中的至少1種作為底物進行反應。