[發明專利]增強了鋅結合力的胰島素衍生物

無效

• 申請號: 01143664.6
• 申請日: 1997-07-25
• 公開（公告）號: CN1362417A
• 公開（公告）日: 2002-08-07
• 發明（設計）人: J·厄特;P·哈伯曼;K·蓋森;G·塞普克
• 申請（專利權）人: 赫徹斯特股份公司
• 主分類號: C07K14/62
• 分類號: C07K14/62;A61K38/20;A61P5/48
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 郭建新

皮下施藥胰島素的藥物動力學依賴于其締合性質。胰島素在中性水溶液中形成六聚體。如果胰島素從組織進入血流而到達作用部位，它必先經過毛細血管壁。據推測只有單分子的或二聚的胰島素才有可能、而六聚的胰島素或較高分子量的相關物則不可能或可能性很小(Brange?et?al.，Diabetes?Care：13(1990)，pp?923-954；Kanget?al.，Diabetes?Care：14(1991)，pp?942-948)。因此六聚體的解離是從皮下組織迅速經過進入血流的先決條件。

胰島素的締合性質和聚集特性受Zn⁺⁺的影響，它會導致六聚體的穩定化并在中性點附近的pH值時導致生成較高分子量的聚集體直至出現沉淀。Zn⁺⁺作為添加劑被加入未緩沖的人胰島素溶液(pH4)卻只是稍微影響作用的形式。盡管這種溶液在注射時在皮下組織中被迅速中和并形成胰島素-鋅復合體，但是人胰島素自然的鋅結合力不足以穩定六聚體和更高的聚集體。通過添加Zn⁺⁺，胰島素的釋放不被顯著延遲而且不會達到強的儲存效果。已知胰島素六聚體的含鋅量是每mol的胰島素六聚體含大約2mol?Zn⁺⁺(Blun-dell?et?al.，Adv.Protein?Chem.：26(1972)，pp?323-328)。每個胰島素六聚體的2個Zn⁺⁺離子與胰島素六聚體牢固結合并且不能被通常的透析除去。所謂的4-鋅胰島素晶體已被公認地描述，但這些晶體平均每mol的胰島素六聚體只含有少于3mol的Zn⁺⁺(G.D.Smith?et?al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA：81，pp?7093-7097)。

本發明的目的是找出這種胰島素衍生物：它與人胰島素相比，具有增強了的鋅結合力，形成含胰島素六聚體和Zn⁺⁺的穩定的復合體，并在皮下注射時出現延遲的作用形式。

式I的胰島素和/或式I的胰島素的生理上耐受的鹽業已被發現，它們基本符合上述條件并且其中R¹表示苯丙氨酸殘基或氫原子，R³表示基因可編碼的氨基酸殘基，Y表示基因可編碼的氨基酸殘基，Z表示a)氨基酸殘基His或

b)具有2～35個基因可編碼的氨基酸殘基的肽，它含1～5個組氨酸殘基，而殘基A2～A20相應于人胰島素、動物胰島素或胰島素衍生物的A鏈的氨基酸序列，并且殘基B2～B29相應于人胰島素、動物胰島素或胰島素衍生物的B鏈的氨基酸序列。

這樣的式I胰島素是特別優選的，其中R¹表示苯丙氨酸殘基，R³表示選自Asn、Gly、Ser、Thr、Ala、Asp、Glu和Gln的氨基酸殘基，Y表示選自Ala、Thr、Ser和His的氨基酸殘基，Z表示a)氨基酸殘基His或

b)具有4～7個氨基酸殘基的肽，它含1或2個組氨酸殘基。

這樣的式I胰島素是更優選的，其中R¹表示苯丙氨酸殘基，R³表示選自Asn、Gly、Ser、Thr、Ala、Asp、Glu和Gln的氨基酸殘基，Y表示選自Ala、Thr、Ser和His的氨基酸殘基，Z表示a)氨基酸殘基His或

b)具有2～7個氨基酸殘基的肽，它含1或2個組氨酸殘基。

這樣的式I胰島素是特別優選的，其中Z表示具有1～5個氨基酸殘基的肽，它含1或2個組氨酸殘基。

這樣的式I胰島素是特別優選的，其中R¹表示苯丙氨酸殘基，R³表示選自Asn和Gly的氨基酸殘基，Y表示選自Thr和His的氨基酸殘基，而Z表示具有1～5個氨基酸殘基的肽，它含1或2個組氨酸殘基。

這樣的式I胰島素是更優選的，其中R¹表示苯丙氨酸殘基，R³表示甘氨酸殘基，Y表示蘇氨酸殘基而Z表示具有1～5個氨基酸殘基的肽，它含1或2個組氨酸殘基。

這樣的式I胰島素是尤為優選的，其中Z表示具有序列His?His、His?His?Arg、Ala?His?His、Ala?His?His?Arg、Ala?Ala?His?His?Arg或Ala?Ala?His?His的肽。