[發明專利]一種多肽——突觸蛋白－9.57和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 01112628.0
• 申請日: 2001-04-18
• 公開（公告）號: CN1381480A
• 公開（公告）日: 2002-11-27
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12P21/02;G01N33/68;C12Q1/68;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/18;A61P31/00;A61P37/02
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——突觸蛋白-9.57，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

突觸蛋白屬于接合的囊泡磷蛋白，它被認為控制了神經傳遞素的釋放。突觸蛋白家族一般都包括了高度聯會的突觸蛋白I，II。兩者都呈現出兩種可選擇的接合變量：IA和IB；IIA和IIB。唯一的不同僅是它們的羧基末端。

在結構上突觸蛋白IA和IB由一個小的N末端區域(稱為“A”區)組成，它包括了一個絲氨酸的殘基，這個殘基能作為用于AMP依賴性蛋白質激酶和Ca²⁺，以及依賴型調鈣蛋白致活酶I的循環性磷酸化作用的位置。“A”區的后面是一個由80個殘基組成的連接器(“B”區)。第三個區域“C”，它包含了300個氨基酸，和肌動蛋白及突觸蛋白囊裝訂有關。第四個區域“D”是脯氨酸富集并包括250個殘基。C末端的終點接合領域是稱為“E”(在IA)或“F”(在IB)。突觸蛋白IIA和IIB結構同樣也由A，B，C區組成，只是“D”區被較小的脯氨酸富集區“G”取代。突觸蛋白IIB以一個較小的“I”區結束。而較大的突觸蛋白IIA的C端由“H”和“E”組成[Sudhof?T.C.，Czernik?A.J.，1989，Science?245：1474-1480]。

研究發現，突觸蛋白的兩種保存區域作為信號模型。第一個是在“A”區保存的八肽，它包含了磷酸化的絲氨酸殘基，第二個模型是一種位于“C”末端的11個殘基的延伸，它是完全保存。該結構域含有以下兩個保守的一致性序列片段：L-R-R-R-L-S-D-S(第一個S是磷酸化的)；G-H-A-H-S-G-M-G-K-V-K[Bahler?M.，BenfenatiF.，1990，BioEssays，12：259-263]。突觸蛋白是最重要的神經傳遞素的釋放和接合功能中心。它存儲神經傳遞素，并隨著血漿膜釋放他們的成分。通過胞內分泌融合，并通過胞外分泌來循環。

本發明的新的多肽的氨基酸序列中亦含有如上所屬的突觸蛋白家族保守的特征性序列片段，由此推斷其是突觸蛋白家族中的新成員。該蛋白在體內亦參與調控多種重要的物質轉運及代謝過程，其突變或表達異常將導致體內神經傳遞素失調，進而引發各種神經系統紊亂的疾病。

由于如上所述突觸蛋白-9.57蛋白在機體內重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的突觸蛋白-9.57蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新突觸蛋白-9.57蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——突觸蛋白-9.57以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼突觸蛋白-9.57的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼突觸蛋白-9.57的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產突觸蛋白-9.57的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——突觸蛋白-9.57的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——突觸蛋白-9.57的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與突觸蛋白-9.57異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中169-432位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1831位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。