[發明專利]用于在真菌細胞中表達基因的啟動子

有效

• 申請號: 00805332.4
• 申請日: 2000-03-22
• 公開（公告）號: CN1367838A
• 公開（公告）日: 2002-09-04
• 發明（設計）人: R·M·伯卡;M·W·雷伊;K·布朗;S·H·布朗
• 申請（專利權）人: 諾沃奇梅茲生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;C12N15/11;C12N15/80
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 唐偉杰

1.制備多肽的方法，包括：

(a)在有利于該多肽產生的培養基中培養真菌宿主細胞，其中該真菌宿主細胞含有編碼該多肽的第一核酸序列和與該第一核酸序列可操作地連接的、含有與第一核酸序列異源的啟動子的第二核酸序列，其中該啟動子含有選自下組的序列：SEQ?ID?NO.1的第1-3949位核苷酸、SEQID?NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ?ID?NO.3的第1-3060位核苷酸，及其子序列；和它們的突變、雜合及串聯啟動子；和

(b)從該培養基分離該多肽。

2.權利要求1的方法，其中該啟動子含有SEQ?ID?NO.1第1-3949位核苷酸或其突變、雜合或串聯啟動子的核酸序列。

3.權利要求2的方法，其中該啟動子含有SEQ?ID?NO.1第1-3949位核苷酸的核酸序列。

4.權利要求3的方法，其中該啟動子含有大腸桿菌NRRL?B-30067中的質粒pECO3所包含的核酸序列。

5.權利要求1的方法，其中該啟動子含有SEQ?ID?NO.2第1-938位核苷酸或其突變、雜合或串聯啟動子的核酸序列。

6.權利要求5的方法，其中該啟動子含有SEQ?ID?NO.2第1-938位核苷酸的核酸序列。

7.權利要求6的方法，其中該啟動子含有大腸桿菌NRRL?B-30071中的質粒pFAMG所包含的核酸序列。

8.權利要求1的方法，其中該啟動子含有SEQ?ID?NO.3第1-3060位核苷酸，其子序列；或其突變、雜合或串聯啟動子的核酸序列。

9.權利要求8的方法，其中該啟動子含有SEQ?ID?NO.3第1-3060位核苷酸的核酸序列。

10.權利要求9的方法，其中該啟動子含有大腸桿菌NRRL?B-30075中的質粒pQUINN所包含的核酸序列。

11.權利要求1、2、5和8之任意一項的方法，其中該突變啟動子由含有一或多個核苷酸替代、缺失和/或插入的選自下組的啟動子組成：SEQ?IDNO.1的第1-3949位核苷酸、SEQ?ID?NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ?IDNO.3的第1-3060位核苷酸，其中該突變啟動子比相應的啟動子具有較強或較弱的啟動子活性。

12.權利要求1、2、5和8之任意一項的方法，其中該雜合啟動子由兩個或更多個啟動子的部分組成。

13.權利要求12的方法，其中該雜合啟動子含有一或多個選自下組的部分：SEQ?ID?NO.1的第1-3949位核苷酸、SEQ?ID?NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ?ID?NO.3的第1-3060位核苷酸。

14.權利要求13的方法，其中該雜合啟動子還含有另一啟動子的部分。

15.權利要求1的方法，其中該串聯啟動子由兩個或多個啟動子組成。

16.權利要求15的方法，其中該串聯啟動子含有兩個或更多個選自下組的啟動子：SEQ?ID?NO.1的第1-3949位核苷酸、SEQ?ID?NO.2的第1-938位核苷酸和SEQ?ID?NO.3的第1-3060位核苷酸。

17.權利要求16的方法，其中該串聯啟動子還含有另一啟動子。

18.權利要求15的方法，其中該串聯啟動子的兩個或更多個啟動子同時啟動所述核酸序列的轉錄。

19.權利要求15的方法，其中該串聯啟動子的兩個或更多個啟動子中的一或多個在所述真菌宿主細胞的不同生長階段啟動所述核酸序列的轉錄。

20.權利要求1-19之任意一項的方法，其中該真菌宿主細胞含有一或多個拷貝的所述核酸序列。

21.權利要求1-19之任意一項的方法，其中該真菌宿主細胞含有一個拷貝的所述核酸序列。

22.權利要求1-21之任意一項的方法，其中所述核酸序列編碼與該真菌宿主細胞異源的多肽。