[發明專利]一種新的多肽——肝素結合蛋白13.09和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00136348.4
• 申請日: 2000-12-26
• 公開（公告）號: CN1361173A
• 公開（公告）日: 2002-07-31
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——肝素結合蛋白13.09，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

在生物體內含有一類細胞外肝素結合蛋白，這些蛋白在生物體內涉及各種細胞的生長與分化調控過程，這類蛋白構成了一新的肝素結合蛋白家族，該家族的成員均為一些生長調節因子[Tsutsui?J.，Uehara?K.et?al.，1991，Biochem?Biophys?ResCommun，176：792-797]。不同來源的該家族的成員均含有較高的序列同源性。

這些生長調節因子是一些高度相關的蛋白，約有140個氨基酸殘基組成，且這些蛋白均含有10個保守的涉及二硫鍵形成的半胱氨酸殘基。該蛋白家族成員的蛋白序列中還富含一些基礎氨基酸殘基和色氨酸。其含10個保守的半胱氨酸殘基的區域如下所示：XXXXXXXCXXXCXXXCXXXXXCXXXCXCXXXXCXXXXCXXXXXXXXXXCXXXXCXXXXXXXXXXXXX

??*************???????*************‘C’：為保守的半胱氨酸殘基，可能涉及二硫鍵的形成。‘*’：為兩個保守的一致性序列片段的位點。

研究發現，該生長因子家族成員的蛋白序列中含有兩個保守的序列片段，這兩個一致性序列片段如下所示：序列片段1：S-[DE]-C-X-[DE]-W-X-W-X(2)-C-X-P-X-[SN]-X-D-C-G-[LIVMA]-G-

???????X-R-E-G；序列片段2：C-[KR]-[LIVM]-P-C-N-W-K-K-X-F-G-A-[DE]-C-K-Y-X-F-[EQ]-X-W-G-

???????X-C；這兩個序列片段均含有大量的半胱氨酸殘基，且在所有的家族成員中均存在。該序列片段可能是蛋白與其它蛋白結合并發揮其生長調節功能的重要活性區域，該兩個片段的突變都將影響蛋白在生物體內發揮正常的生理功能。該蛋白家族的成員在生物體內涉及各種細胞分化及生長的重要調節過程，該類蛋白的表達異常將導致生物體一些相關代謝途徑的異常。該蛋白的表達異常通常與生物體內各種發育代謝紊亂癥、一些腫瘤及癌癥等疾病的發生相關。

由于如上所述肝素結合蛋白13.09蛋白在機體內重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的肝素結合蛋白13.09蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新肝素結合蛋白13.09蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——肝素結合蛋白13.09以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼肝素結合蛋白13.09的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼肝素結合蛋白13.09的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產肝素結合蛋白13.09的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——肝素結合蛋白13.09的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——肝素結合蛋白13.09的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與肝素結合蛋白13.09異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中69-428位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1780位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。