[發(fā)明專利]一種新的多肽——整合蛋白10.34和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00135903.7
• 申請(qǐng)日: 2000-12-26
• 公開（公告）號(hào): CN1361113A
• 公開（公告）日: 2002-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/00
• 分類號(hào): C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——整合蛋白10.34，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

整合蛋白為一種與細(xì)胞粘合有關(guān)的受體家族。它位于細(xì)胞表面，介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞以及細(xì)胞-基質(zhì)相互作用是由幾種不同的受體家族介導(dǎo)的。這些受體蛋白除了能夠?qū)⒓?xì)胞靶至細(xì)胞外基質(zhì)以及相鄰細(xì)胞上的特異蛋白上之外，還參與許多重要的生理過(guò)程包括細(xì)胞生長(zhǎng)，細(xì)胞分化，細(xì)胞連接形成，以及細(xì)胞極性化等等。現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了幾種與細(xì)胞粘合有關(guān)的受體家族，包括：1、整合蛋白；2、免疫球蛋白超家族的粘合分子，參與細(xì)胞-細(xì)胞粘合以及在胚胎發(fā)生，傷口愈合以及炎癥反應(yīng)中起非常重要的作用；3、LEC-CAMs蛋白，包含類外源凝集素的結(jié)構(gòu)域，介導(dǎo)白細(xì)胞/內(nèi)皮細(xì)胞粘合；4、鈣粘著蛋白；5、歸家受體(homing?receptors)，介導(dǎo)淋巴細(xì)胞于特異的淋巴組織的結(jié)合。

整合蛋白(Integrin)是細(xì)胞表面受體的一個(gè)大家族，介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞以及細(xì)胞-基質(zhì)的附著。這種細(xì)胞-細(xì)胞以及細(xì)胞-基質(zhì)相互作用對(duì)細(xì)胞的增殖以及分化有重要意義。整合蛋白還可以提高細(xì)胞生存的幾率。研究發(fā)現(xiàn)，阻斷整合蛋白與細(xì)胞外基質(zhì)特定的成分的粘合會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡?！綜ancer?Metastasis?Rev.14，191-203】最近發(fā)現(xiàn)，在小鼠中，特定整合蛋白的缺乏會(huì)導(dǎo)致肌肉細(xì)胞的退化性疾病，說(shuō)明了整合蛋白在肌肉細(xì)胞存活中的重要作用?！綨at.Genet.17，318-323】

在整合蛋白結(jié)合到細(xì)胞外的配體上時(shí)，會(huì)激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)。這說(shuō)明整合蛋白是一種真正的信號(hào)分子?！維cience?268，233-239】整合蛋白所激活的細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)通路隨著整合蛋白與配體的不同以及細(xì)胞種類的不同而變化。整合蛋白所介導(dǎo)的信號(hào)通路的最初反應(yīng)是在結(jié)合部位形成整合蛋白的集聚，然后引起樁蛋白(paxillin)，踝蛋白(talin)以及焦點(diǎn)粘合激酶(FAK)1等蛋白的酪氨酸磷酸化。FAK是在加速細(xì)胞擴(kuò)散和細(xì)胞存活的信號(hào)調(diào)控中的關(guān)鍵酶?！綪roc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89，5192-5196】

有些整合蛋白識(shí)別細(xì)胞外基質(zhì)蛋白配體的R-G-D序列。整合蛋白包含一個(gè)由α鏈和β鏈組成的二聚物。每個(gè)亞基包含一個(gè)大的N端胞外結(jié)構(gòu)，后接一個(gè)跨膜區(qū)域和一個(gè)短的C端胞內(nèi)區(qū)域。有些受體的β鏈相同，但α鏈不同。所有的整合蛋白的β鏈的細(xì)胞外部分的N端包含四個(gè)由40氨基酸殘基所構(gòu)成的重復(fù)序列。每個(gè)重復(fù)序列都含有8個(gè)半胱氨酸。下面一段序列包含5個(gè)這樣的保守半胱氨酸，可以作為整合蛋白的特征序列：C-x-[GNQ]-x(1，3)-G-x-C-x-C-x(2)-C-x-C，其中的五個(gè)C可能參與形成二硫鍵。

通過(guò)基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質(zhì)瘤中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與整合蛋白的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為整合蛋白10.34。

由于如上所述整合蛋白10.34蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的整合蛋白10.34蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新整合蛋白10.34蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——整合蛋白10.34以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼整合蛋白10.34的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼整合蛋白10.34的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)整合蛋白10.34的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——整合蛋白10.34的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——整合蛋白10.34的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與整合蛋白10.34異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。